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文檔簡介
1、目的:通過對不同時期增生期瘢痕成纖維細(xì)胞的細(xì)胞周期相關(guān)基因skp2,E2F1及蛋白的表達(dá)變化與同時期成纖維細(xì)胞所處的細(xì)胞周期的相關(guān)性進(jìn)行探討,為基因干擾治療用于增生性瘢痕的防治提供前期研究基礎(chǔ)。
方法:手術(shù)切取三個月,六個月,一年及兩年的增生性瘢痕及正常皮膚各8例。用實時熒光定量PCR(RT-PCR)法檢測各時期增生性瘢痕及正常皮膚中skp2,E2F1的mRNA表達(dá):蛋白質(zhì)免疫印跡(Western blotting)法檢測
2、標(biāo)本中二者蛋白表達(dá)水平:用流式細(xì)胞術(shù)檢測各時期增生性瘢痕中成纖維細(xì)胞的細(xì)胞周期分布情況。
結(jié)果:(1)隨著HS的發(fā)展,增生性瘢痕的成纖維細(xì)胞中skp2的mRNA及蛋白表達(dá)強(qiáng)度由強(qiáng)變?nèi)?,其表達(dá)趨勢基本一致。3個月組、6個月組分別與1年組、2年組及正常組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),前兩者之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),后三者之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。E2F1的mRNA及蛋白表達(dá)在增生性瘢痕早期也是明
3、顯高于晚期,而且兩者的表達(dá)趨勢也基本一致。3個月組、6個月組分別與1年組、2年組、正常組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);3個月組與6個月組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);1年組、2年組、正常組之間比較差異也無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。(2)流式細(xì)胞儀檢測結(jié)果:3個月、6個月增生性瘢痕成纖維細(xì)胞主要分布在S、G2/M期;而1年組、2年組增生性瘢痕及正常組的成纖維細(xì)胞多處于G0/G1期。G0/G1、S期比例:3個月組和6個月組
4、比較無差異(P>0.05);3個月、6個月組分別與1年、2年及正常組有差異(P<0.05);1年組與2年組及正常組(P<0.05):2年組與正常組無差異(P>0.05)。G2/M期比例:3個月組高于6個月組(P<0.05);3個月、6個月組分別高與1年、2年和正常組(P<0.05);1年、2年和正常組無差異(P>0.05)。
結(jié)論:(1)增生性瘢痕早期存在細(xì)胞周期調(diào)控因子skp2,E2F1的表達(dá)異常,可能與增生性瘢痕早期成
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