泰山紫草提取物-乙酰紫草素誘導(dǎo)前列腺癌PC3細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究.pdf

1、背景與目的：
　　泰山紫草為傳統(tǒng)中藥，是泰山四大名藥之一，屬硬紫草，其有效成分為多種萘醌類物質(zhì)?，F(xiàn)代藥學(xué)研究證明紫草具有治療燒傷、強(qiáng)心、抗炎、抗菌、抗病毒及抗腫瘤等作用。為了進(jìn)一步研究泰山紫草抗腫瘤機(jī)制，本課題組的前期研究從泰山紫草中分離純化得到了三種主要成分:乙酰紫草素、β-羥基異戊酰紫草素和異丁酰紫草素;發(fā)現(xiàn)乙酰紫草素能抑制多種腫瘤細(xì)胞系的生長(zhǎng)，并可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。有關(guān)紫草素（軟紫草中含量較多的一種萘醌類物質(zhì)）抗腫瘤的研究近

2、幾年已有文獻(xiàn)報(bào)道，但乙酰紫草素抗腫瘤作用的研究報(bào)道較少，其分子機(jī)制尚不清楚，值得研究探討。本研究以乙酰紫草素為誘導(dǎo)劑，通過MTT法已經(jīng)篩選出前列腺癌PC3細(xì)胞株為乙酰紫草素細(xì)胞毒性敏感的細(xì)胞株，并從形態(tài)學(xué)和部分生化指標(biāo)觀察到明顯的凋亡特征。進(jìn)一步研究乙酰紫草素誘導(dǎo)前列腺癌PC3細(xì)胞株凋亡的分子機(jī)制，為天然新型抗腫瘤藥物的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
　　方法：
　　MTT法檢測(cè)乙酰紫草素對(duì)前列腺癌PC3細(xì)胞增殖的影響;流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周

3、期和線粒體膜電位的變化;Annexin-V/PI雙染分析凋亡率;實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)凋亡相關(guān)基因表達(dá)水平;Western blotting檢測(cè)相關(guān)蛋白的表達(dá)和激活。
　　結(jié)果：
　　乙酰紫草素顯著抑制PC3細(xì)胞的生長(zhǎng)，其半數(shù)抑制濃度(IC50)為8.59±0.42μM，并使細(xì)胞周期阻滯在S期。乙酰紫草素抑制Bcl-2蛋白的表達(dá)，促進(jìn)Bax的表達(dá)，引起線粒體膜電位下降，導(dǎo)致細(xì)胞色素c釋放，進(jìn)而通過激活內(nèi)源性凋亡途徑誘導(dǎo)PC3