miR-145對(duì)前列腺癌PC-3細(xì)胞增殖和凋亡及其調(diào)控基因表達(dá)的影響.pdf

1、目的:研究miR-145對(duì)前列腺癌PC-3細(xì)胞系增殖和凋亡及其調(diào)控基因表達(dá)的影響。
　　方法:常規(guī)培養(yǎng)前列腺癌PC-3細(xì)胞株,實(shí)驗(yàn)分為3組:不做任何處理的PC-3細(xì)胞為空白對(duì)照組,僅轉(zhuǎn)染不表達(dá)miR-145的空白病毒載體為陰性對(duì)照組,轉(zhuǎn)染有表達(dá)miR-145的慢病毒載體為mir-145轉(zhuǎn)染組。感染后72h,熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞,判斷細(xì)胞的感染效率,熒光定量PCR檢測(cè)miRNA-145的表達(dá)情況,用MTT法檢測(cè)前列腺癌PC-3細(xì)胞的

2、增殖能力,應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡,RT-PCR檢測(cè)預(yù)測(cè)的miR-145調(diào)控基因(C-MYC, IRS1,IGF1R,CDKN1A,CCNA2)的表達(dá)變化。
　　結(jié)果:72小時(shí)后熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率達(dá)80％。熒光定量PCR結(jié)果顯示:miR-145轉(zhuǎn)染組的miR-145表達(dá)水平較陰性對(duì)照組、空白對(duì)照組明顯上調(diào)(p<0.05)。MTT結(jié)果顯示,miR-145轉(zhuǎn)染組的細(xì)胞增殖活性明顯低于空載體組和空白對(duì)照組。流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示