防己諾林堿抑制前列腺癌PC-3細胞增殖的機制研究.pdf

1、粉防己（fenfangji），RadiXStephaniae Tetrandrae，別名漢房己，白木香，為房己科植物石蟾蜍Stephania Tetrandra S.Moore的根。含多種異喹啉生物堿，主要藥用成分為粉防己堿（tetrandrine）和防己諾林堿（fangchinoline）。其目前主要的功效有利水消腫，祛風止痛。用于水腫腳氣，小便不利，風濕痹痛，濕疹瘡毒，高血壓癥。目前研究發(fā)現(xiàn)粉防己堿能顯著抑制腫瘤細胞增殖，因此具有很

2、好的藥物開發(fā)價值。但是對其結構非常相似的防己諾林堿的抗腫瘤研究則相對甚少，本文將以人類前列腺癌PC-3細胞為研究材料，應用RT-PCR，Western blotting以及裸鼠模型等實驗方法研究防己諾林堿對PC-3細胞的增殖影響，主要研究結果包括以下幾個方面:
　　 1)防己諾林堿具有劑量和時間依賴性地抑制前列腺癌PC-3細胞增殖的作用。MTT實驗顯示分別用10、20、30 μm/ml防己諾林堿處理PC-3細胞1-4天后,30

3、μm/ml防己諾林堿處理細胞4天后的抑制效果最好，達到86％抑制率；通過對細胞周期研究發(fā)現(xiàn)30 μm/ml防己諾林堿處理PC-3細胞1天后，PC-3細胞明顯被阻斷在G1/S期。Western blotting結果則進一步證實防己諾林堿能調節(jié)PC-3細胞中細胞周期相關蛋白Cyclin D1、p27以及PCNA的表達。30 μm/ml防己諾林堿處理PC-3細胞1天后，參與細胞周期G1/S期的Cyclin D1和PCNA明顯下降，而抑制細胞增

4、殖的p27蛋白表達量顯著性上升。
　　 2)Western blotting檢測PC-3細胞在經過防己諾林堿處理后，細胞內參與細胞凋亡的相關蛋白的表達量變化。PC-3細胞在30 μm/ml防己諾林堿處理1天后，細胞內的促凋亡蛋白Bax和激活型Caspase-3蛋白表達量都顯著上升，同時抗細胞凋亡的Bcl-2蛋白表達量則顯著下降。
　　 3)本文構建裸鼠模型來進一步驗證防己諾林堿的抑制腫瘤生長效果，結果顯示連續(xù)用防己諾林堿