殼聚糖膜緩釋給藥系統(tǒng)植入脈絡(luò)膜上腔治療兔眼金黃色葡萄球菌性眼內(nèi)炎.pdf

1、目的： 比較玻璃體腔注射萬古霉素聯(lián)合脈絡(luò)膜上腔植入載有曲安奈德的殼聚糖藥膜、玻璃體腔注射萬古霉素聯(lián)合曲安奈德混懸液和玻璃體腔單獨注射萬古霉素對兔金黃色葡萄球菌性眼內(nèi)炎的治療作用，評價殼聚糖緩釋藥膜植入脈絡(luò)膜上腔的安全性及有效性。 方法： 選取健康青紫藍兔30只(廣州軍區(qū)武漢總醫(yī)院實驗中心提供)，體重2.5～3.0kg，雌雄不限，術(shù)前裂隙燈、間接眼底鏡排除眼部疾患。實驗兔均于右眼玻璃體腔注射ATCC25923標(biāo)準金

2、黃色葡萄菌104CFU/0.1mL混懸液0.1mL，建立眼內(nèi)炎模型24h后，確認模型建立成功，將實驗動物隨機分為3組，每組10只眼，A(玻璃體腔注射萬古霉素)組、B(玻璃體腔注射萬古霉素+曲安奈德混懸劑)組、C(玻璃體腔注射萬古霉素+脈絡(luò)膜上腔植入殼聚糖緩釋藥膜(載曲安奈德))組。載有曲安奈德的殼聚糖膜緩釋給藥系統(tǒng)由武漢理工大學(xué)生物中心提供。干預(yù)后每日裂隙燈及間接眼底鏡觀察，于干預(yù)后第3、7、14天進行臨床炎癥評分，干預(yù)后第7、14天進

3、行眼前節(jié)照相；干預(yù)5d抽取少許玻璃體進行細菌培養(yǎng)；注射細菌24小時后及干預(yù)后14d進行B超檢查，觀察玻璃體腔積膿及視網(wǎng)膜脫離情況；干預(yù)后14d摘除所有術(shù)眼行光鏡檢查了解視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)的完整性、電鏡觀察視網(wǎng)膜色素上皮細胞超微結(jié)構(gòu)的改變。采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學(xué)分析。不同時間點各組間臨床炎癥評分采用多個相關(guān)樣本的非參數(shù)檢驗的Friedman檢驗法、各組間細菌培養(yǎng)陽性率采用R×C資料的x2檢驗、視網(wǎng)膜脫離發(fā)生率的比較采用R×C

4、資料的x2檢驗，各組間率的比較采用Bonfferoni檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)果： 注入細菌后24h，所有實驗動物眼瞼水腫，結(jié)膜明顯充血、水腫，角膜水腫明顯，前房閃輝(+)，前房滲出(+)。干預(yù)后3d、7d、14d進行臨床炎癥分級，可見所有實驗動物角膜逐漸透明，前房閃輝逐漸減輕，滲出趨于吸收，玻璃體混濁不同程度減輕，C組炎癥減輕明顯。不同觀察點3d、7d、14d，3組間比較統(tǒng)計結(jié)果：1)結(jié)膜量分別為x2

5、=8.720，14.788，13.034；P=0.013，0.001，0.001；2)角膜統(tǒng)計量分別為x2=11.793，7.063，11.308；p=0.003，0.000，0.004；3)虹膜統(tǒng)計量分別為x2=8.897，13.786，9.923；P=0.012，0.001，0.007；4)玻璃體統(tǒng)計量分別為x2=8.000，7.760，9.923；P=0.018，0.021，0.007。不同時間點兩兩組間結(jié)膜、角膜、虹膜和玻璃體評

6、分均有顯著性差異P<0.05。干預(yù)后5d玻璃體細菌學(xué)培養(yǎng)檢出情況：A組3/10，B組3/10，C組2/10；A、B、C3組間細菌培養(yǎng)陽性檢出率無統(tǒng)計學(xué)意義P=0.830。注入細菌后24h，B超檢查顯示全部實驗動物玻璃體腔均有積膿形成，脈絡(luò)膜增厚；干預(yù)后14d再次行B超檢查，不同治療方法利用R×C資料的z2檢驗：3組間視網(wǎng)膜脫離有顯著性差異x2=8.416，P=0.015。各組間率的比較采用Bontferoni檢驗：A、B組間視網(wǎng)膜脫離率

7、無顯著性差異(P=0.322)說明B法并不優(yōu)于A法；B、C組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.002)，A、C組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)，C法優(yōu)于A、B法。干預(yù)后14d，大體標(biāo)本可見A、B組角膜均呈中度或輕度水腫，C組角膜透明；A、B2組玻璃體腔幾乎均有積膿，C組藥膜植入處微隆起，縫線可見。玻璃體腔均未見積膿形成。光鏡下，A、B2組角膜鱗狀上皮增生，炎性細胞浸潤，角膜層間可見血管長入，C組角膜各層完整，無水腫，接近正常角膜；A、B

8、2組虹膜水腫、增生明顯，部分血管擴張，急、慢性炎細胞浸潤；C組虹膜無充血。A組玻璃體腔大量滲出、炎性細胞浸潤、壞死物及變性的玻璃體均質(zhì)紅染，視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)紊亂，視網(wǎng)膜各層細胞廣泛壞死；B組玻璃體腔局部紅染，散在的炎細胞浸潤，視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)基本正常，內(nèi)、外顆粒層分布紊亂，神經(jīng)上皮層脫失；C組玻璃體腔玻璃體腔少許炎細胞浸潤，未見明顯變性的玻璃體，視網(wǎng)膜各層次分明，結(jié)構(gòu)清晰，脈絡(luò)膜血管增粗，間隙放置藥膜處見殘余的藥膜均質(zhì)紅染，周圍未見炎細胞浸潤。干預(yù)

9、14d透射電鏡下可見，A組視網(wǎng)膜色素上皮層正常細胞形態(tài)幾乎消失，大量空泡樣改變，細胞器不能辨認，C組視網(wǎng)膜色素上皮層細胞形態(tài)規(guī)則，細胞器顯示清晰，B組介于兩者之間。 結(jié)論： 殼聚糖藥膜有良好的組織相容性，植入實驗兔脈絡(luò)膜上腔無眼刺激性，殼聚糖藥膜初期的藥物暴釋現(xiàn)象控制了炎癥的進一步發(fā)展，而將藥膜植入脈絡(luò)膜上腔更是讓抗菌素充分的發(fā)揮了其強大的抗菌作用。玻璃體腔注射萬古霉素聯(lián)合殼聚糖藥膜植入脈絡(luò)膜上腔使得萬古霉素和曲安奈德在