牛乳中金黃色葡萄球菌生物被膜形成條件的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、試驗(yàn)對金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)分離株進(jìn)行16StrDNA序列比對分析,結(jié)果表明與模式菌株同源性達(dá)到98%。
   建立并驗(yàn)證包括培養(yǎng)、定性、定量分析乳源金黃色葡萄球菌生物被膜的方法,掃描電鏡法和銀染法定性觀察不銹鋼片表面乳源金黃色葡萄球菌生物被膜形成情況,結(jié)果表明:乳源金黃色葡萄球培養(yǎng)12h后可形成成熟的生物被膜,銀染法觀察呈黑色片狀或絮狀,掃描電鏡法觀察隱約可見細(xì)菌之間有細(xì)絲狀粘液物。超聲波

2、平板法定量測定培養(yǎng)1~7d后不銹鋼表面形成的生物被膜活菌數(shù)可達(dá)10~5cfu/mL,且生物被膜活菌數(shù)在7d內(nèi)基本保持穩(wěn)定。
   單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)可知:超聲波平板測定法剝離或去除乳源金黃色葡萄球菌生物被膜的最佳條件為:功率:100w,溫度:35℃,時間:12min。建立響應(yīng)面方差分析模型,結(jié)果表明:該模型顯著(p<0.05),模型確定系數(shù)R2:0.9107,校正系數(shù)adjR2=0.7172,模型與實(shí)際情況擬合較好。三個因素對

3、超聲波平板法剝離或去除經(jīng)黃色葡萄球菌BF的影響效果依次為:功率>時間>溫度。
   研究形成條件對乳源金黃色葡萄球菌生物被膜生長的影響,結(jié)果表明:培養(yǎng)溫度、外源糖分、氯化鈉、與乳酸菌混合培養(yǎng)、營養(yǎng)液中浮游細(xì)菌含量、金屬陽離子及其螯合劑(EDTA)等因素可對生物被膜生長產(chǎn)生影響。其中,接近金黃色葡萄球菌最適生長溫度有利于其生物被膜的形成;外源糖分在特定的濃度下可對生物被膜的生長有微弱或較強(qiáng)的誘導(dǎo)作用,其中果糖與葡萄糖對乳源金黃色葡

4、萄球菌生物被膜的生長影響極顯著(P<0.001);低濃度的氯化鈉對生物被膜的生長有促進(jìn)作用;嗜熱鏈球菌(Streptococcus thermophillus)、保加利亞乳桿菌(Lactobacillus bulgaricus)與金黃色葡萄球菌混合培養(yǎng)對BF有抑制作用;培養(yǎng)環(huán)境中浮游細(xì)菌數(shù)量與形成的生物被膜活菌數(shù)呈反比關(guān)系;金屬陽離子及其螯合劑(EDTA)對乳源金黃色葡萄球菌BF影響結(jié)果表明:Ba2+和Ca2+對生物被膜的形成不產(chǎn)生顯著

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