角質(zhì)細胞生長因子（KGF）及其受體（KGFR）在口腔扁平苔蘚中的表達.pdf

1、扁平苔蘚(LP)是一種伴有慢性淺表性炎癥的皮膚-粘膜角化異常性疾病。皮膚及粘膜可單獨或同時發(fā)病?？谇徊p稱為口腔扁平苔蘚(OLlP)是口腔粘膜病中最常見的疾病之一，部分病損可發(fā)生惡變，世界衛(wèi)生組織(WTO)將其列為可能的癌前狀態(tài)。其典型病理特征為上皮下淋巴細胞浸潤帶、上皮內(nèi)T細胞數(shù)量增多和基底上皮細胞液化變性。在臨床上可分為網(wǎng)紋型、丘疹型、斑塊型、水皰型、萎縮型和糜爛型6種。OLP的病因至今尚不十分清楚，目前認為是一種T細胞介導(dǎo)的免疫反

2、應(yīng)，其病程慢性遷延，治療已成為臨床上一個相當棘手的問題，目前還沒有治愈OLP的方法。實驗發(fā)現(xiàn)角質(zhì)細胞生長因子(KGF)能特異性的促進上皮細胞的增殖，而不作用于成纖維細胞和內(nèi)皮細胞，可用于治療因上皮細胞損傷引起的潰瘍，加速傷口的愈合。本實驗通過免疫組化及原位雜交技術(shù)檢測正?？谇徽衬づc口腔扁平苔蘚組織中KGF、KGFR蛋白及KGF mRNA的分布情況，以觀察KGF及其受體KGFR在口腔扁平苔蘚中的變化情況，探討其在口腔扁平苔蘚發(fā)生過程中的作

3、用及意義，為臨床上治療口腔扁平苔蘚提供新的思路。 方法： 1．收集臨床及病理確診的正?？谇徽衬?0例及口腔扁平苔蘚粘膜30例，將每個標本的七張連續(xù)切片分別進行HE染色、免疫組化、原位雜交和陰性對照(3張)。根據(jù)免疫組化結(jié)果從蛋白水平觀察KGF和KGFR在兩種組織中的表達；根據(jù)原位雜交結(jié)果從分子水平觀察KGF在兩種組織中的表達情況。 2．對免疫組化及原位雜交的結(jié)果進行圖像分析：切片輸人圖像分析系統(tǒng)，對表達強度進行半

4、定量分析。每張切片計算5個高倍視野下總陽性細胞數(shù)，并取其均數(shù)；同時自切片染色的中心區(qū)域上下左右各選擇相同面積有代表性的區(qū)域，檢測平均光密度(OD)。 3．采用SPSS軟件對實驗結(jié)果進行統(tǒng)計學處理。KGF mRNA陽性細胞數(shù)及光密度值和KGF、KGFR蛋白光密度值，結(jié)果以均數(shù)和標準差(X±s)描述。顯著性檢驗采用單因素方差分析，組問比較采用t檢驗。P<0.05有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果： 1、KGF免疫組化結(jié)果顯示：在正

5、?？谇徽衬ぶ校珜由掀ぜ毎陌|(zhì)中均可見KGF陽性表達，KGF在基底層細胞胞質(zhì)中的表達較弱，呈陽性表達。在棘層細胞胞質(zhì)中表達明顯增加，呈強陽性表達。角化層也可見陽性著色。結(jié)締組織中，部分成纖維細胞、血管內(nèi)皮細胞的胞質(zhì)中可見KGF陽性表達；在口腔扁平苔蘚組織中，KGF在上皮細胞的表達與在正常口腔粘膜相似，但染色強度較正?？谇徽衬p弱，陽性表達主要位于棘層細胞胞質(zhì)中。在基底層細胞胞質(zhì)中，KGF弱陽性表達。在結(jié)締組織中，也可見部分成纖維細胞及

6、血管內(nèi)皮細胞胞質(zhì)中KGF陽性表達，但染色強度較正?？谇徽衬p弱。 2、KGFR免疫組化結(jié)果顯示：在正?？谇徽衬ぶ?，KGFR在全層上皮細胞胞膜、部分細胞胞質(zhì)中陽性表達。KGFR在基底層的表達最強，呈強陽性表達。其余各層陽性表達均勻。結(jié)締組織中，部分血管內(nèi)皮細胞的胞膜和胞質(zhì)中可見KGFR陽性表達，成纖維細胞未見KGFR陽性表達；在口腔扁平苔蘚組織中，KGFR在上皮細胞的陽性表達主要位于棘層及基底層細胞胞膜和胞質(zhì)中。結(jié)締組織中，可見大

7、量的血管內(nèi)皮細胞陽性著色，染色程度較正?？谇徽衬ぴ鰪?。成纖維細胞亦未見KGFR陽性表達。 3、免疫組化結(jié)果平均光密度檢測：與正?？谇徽衬そM相比，KGF在口腔扁平苔蘚上皮和間質(zhì)中的表達均降低，兩組問均存在顯著性差異；與正?？谇徽衬そM相比， KGFR在口腔扁平苔蘚組上皮中的表達降低，兩組間存在顯著性差異，而在間質(zhì)中的表達增強，兩組問存在顯著性差異。 4、原位雜交結(jié)果顯示：兩種組織的結(jié)締組織中部分成纖維細胞、部分血管內(nèi)皮細胞胞