PDGF-α受體反義寡核苷酸防治增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:研究PDGF-α受體反義寡核苷酸對(duì)增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變(PVR)的防治作用。
　　方法:選擇PDGFR-αASODN/lipofectamineTM 2000比值1:1、1:2.5、1:5制備復(fù)合物轉(zhuǎn)染至HRPE細(xì)胞中,轉(zhuǎn)染24h后,觀察轉(zhuǎn)染效率。PVR模型選擇健康成年有色家兔24只隨機(jī)分為玻璃體腔注射人視網(wǎng)膜色素上皮(HRPE)細(xì)胞稀釋液組(A組,右眼8只)、1.0與2.0μmol/LPDGFR-αASODN脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的

2、RPE細(xì)胞稀釋液組(B組和C組,右眼各8只)。左眼注射平衡鹽溶液(BSS)0.1ml作為對(duì)照。術(shù)后1、2、3、4周進(jìn)行眼部檢查,包括間接眼底鏡、裂隙燈檢查觀察PVR程度。術(shù)后4周處死動(dòng)物后,典型的PVR眼進(jìn)行組織病理學(xué)檢查觀察眼底改變、免疫組織化學(xué)染色觀察PDGF-α濃度。
　　結(jié)果:當(dāng)PDGFR-αASODN/lipofectamineTM 2000比值為1:2.5時(shí),HRPE細(xì)胞最佳轉(zhuǎn)染效率。PVR分級(jí):A組第1~2周出現(xiàn)視網(wǎng)

3、膜脫離,PVR隨著時(shí)間延長(zhǎng)發(fā)展至更嚴(yán)重等級(jí);B、C組也發(fā)生PVR,但其嚴(yán)重程度低于A組(均為P<0.05),C組比B組更低;對(duì)照組無明顯眼底改變。組織病理學(xué)檢查:造模后A組可見視網(wǎng)膜表面紅染的條索狀、網(wǎng)狀膠原纖維,視網(wǎng)膜各層結(jié)構(gòu)欠清,B組和C組病變程度低于A組,C組比B組更低;對(duì)照組視網(wǎng)膜全層結(jié)構(gòu)清楚。免疫組化檢查:A組視網(wǎng)膜全層細(xì)胞及增生的纖維組織內(nèi)呈高強(qiáng)度棕黃色著色(++++),B組呈中等強(qiáng)度棕黃色著色(+++),C組呈較弱棕黃色著