鹽酸多西環(huán)素治療角膜新生血管的實驗研究.pdf

1、目的 角膜新生血管(comeal neovascularization，CNV)多見于感染、炎癥、外傷或角膜手術(shù)后。CNV是眼表疾病的顯著特征之一，血管化的角膜不但嚴重影響視力，而且是角膜移植失敗的主要原因。近年來研究表明基質(zhì)金屬蛋白酶對角膜新生血管的形成有重要作用。基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metal-loproteinases，MMPs)是一族．Zn<'2+>依賴性內(nèi)源性蛋白水解酶，以水解細胞外基質(zhì)為主要功能。新生血管的

2、生成不僅需要降解血管基底膜，而且需要細胞外基質(zhì)的降解來有利于血管內(nèi)皮細胞的移行和增殖。目前，對基質(zhì)金屬蛋白酶活性表達的干擾已成為治療新生血管的新靶點。研究顯示四環(huán)素類抗生素獨立于抗菌活性之外，能夠通過競爭性結(jié)合基質(zhì)金屬蛋白酶活性中心的Zn<'2+>來抑制MMPS降解細胞外基質(zhì)。鹽酸多西環(huán)素(doxycycline)是目前臨床可應(yīng)用的毒性較低而活性最強的MMPs抑制劑之一。我們采用囊袋法誘導(dǎo)角膜新生血管模型，觀察鹽酸多西環(huán)素全身和局部應(yīng)用

3、對角膜新生血管生長的影響，并對角膜組織中血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的表達進行免疫組織化學(xué)檢測，以進一步探討MMPs和NV的關(guān)系。 方法 角膜囊袋法誘導(dǎo)新生血管模型，28只新西蘭白兔隨機分為空白對照組(A)、角膜新生血管對照組(B)、鹽酸多西環(huán)素腹腔注射組(C)和結(jié)膜下注射組(D)。比較第3、7、14、21d各組新生血管生長面積和抑制率，行角膜組織病理

4、學(xué)觀察并采用免疫組化法檢測血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)在角膜組織中的表達，探討鹽酸多西環(huán)素對角膜新生血管的抑制作用及作用機制。 結(jié)果新生血管對照組與空白對照組相比，角膜組織可見大量新生血管形成，炎癥細胞浸潤明顯，說明角膜新生血管動物模型誘導(dǎo)成功。鹽酸多西環(huán)素治療組和對照組相比，新生血管稀疏，管腔細小，生長面積明顯縮小(P<0.01)；鹽酸多西環(huán)素腹腔注射組和結(jié)膜下注射組均未見角膜明顯水腫，球結(jié)膜下注射組新生血管出現(xiàn)時間較晚，血管

5、生長速度和血管密度均小于腹腔注射組，且二者差異同樣具有顯著性(P<0.01)。免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示，在正常角膜組織，VEGF不表達或在上皮基底膜有微弱表達；新生血管對照組角膜組織可見以血管內(nèi)皮細胞為主的胞漿內(nèi)VEGF表達明顯增強，呈棕黃色或棕色顆粒，其表達部位主要分布在形成的新生血管區(qū)域；鹽酸多西環(huán)素腹腔注射組和結(jié)膜下注射組較新生血管對照組血管稀疏，管腔細小，相應(yīng)VEGF表達明顯減低。 結(jié)論 鹽酸多西環(huán)素球結(jié)膜下注射