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文檔簡(jiǎn)介
1、[目的]:探討IDO(indoleamine2,3-dioxygenase,吲哚胺2,3雙加氧酶)在體內(nèi)外對(duì)小鼠移植肝細(xì)胞功能的影響。
[方法]:用攜帶IDO基因的重組腺病毒轉(zhuǎn)染BABL/c小鼠的肝臟,采用膠原酶在體灌注和離體消化的方法分離小鼠肝細(xì)胞,臺(tái)盼藍(lán)拒染法檢測(cè)肝細(xì)胞活性,RT—PCR和Western Blot法分別檢測(cè)肝細(xì)胞中IDO基因及蛋白表達(dá)。BABL/c小鼠隨機(jī)分五組,分別為單純肝細(xì)胞組、IDO組、CsA組、
2、IDO+1-MT組、空殼腺病毒組。在體外將五組肝細(xì)胞分別與C57BL/6的脾臟T淋巴細(xì)胞共同培養(yǎng),于1、2、3、4、5天取上清,用ELISA試劑盒檢測(cè)ALT、LDH含量并加以比較。在體內(nèi)分別將五組肝細(xì)胞移植入C57BL/6的脾臟,于1、3、5、7、10天取脾臟勻漿,用ELISA試劑盒檢測(cè)ALT、LDH含量,并加以比較。
[結(jié)果]:用腺病毒載體攜帶的IDO基因轉(zhuǎn)染肝細(xì)胞后,肝細(xì)胞可以有效表達(dá)IDO,體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中均發(fā)現(xiàn)表達(dá)ID
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