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文檔簡介
1、目的:探討SIRT6能否延緩軟骨種子細胞在培養(yǎng)和分化過程衰老和維持軟骨細胞表型,明確SIRT6具有優(yōu)化軟骨種子細胞的作用。
方法:分離培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs),在軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基條件下向軟骨細胞分化。利用倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài),免疫熒光檢測軟骨細胞相關(guān)標記物Ⅱ型膠原的表達,確定骨髓基質(zhì)細胞向軟骨細胞定向分化成功。骨髓基質(zhì)細胞向軟骨細胞定向分化成功后,通過基因轉(zhuǎn)染技術(shù),SIRT6基因轉(zhuǎn)染軟骨細胞。RT-PCR檢測轉(zhuǎn)染
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