人骨髓間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞誘導分化的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、【目的】:研究人骨髓問充質(zhì)干細胞(humanBonemarrowMesenchymal Stemcells,hBMSCs)在體外單層培養(yǎng)條件下誘導為軟骨細胞可行性;研究骨髓間充質(zhì)干細胞與脫鈣骨復合物在三維誘導培養(yǎng)條件下,回植到裸鼠皮下環(huán)境中組織形成情況,為軟骨組織工程臨床應用提供初步實驗和理論依據(jù).【材料與方法】:應用percoll密度梯度離心技術(shù),分離得到第一代骨髓間充質(zhì)干細胞進行體外培養(yǎng)誘導.實驗在兩種條件下進行,即單層誘導培養(yǎng)和三

2、維誘導培養(yǎng)(支架為脫鈣骨),每種實驗條件各設(shè)誘導組和未誘導組,誘導組用含有TGF—β3、地塞米松等特定誘導培養(yǎng)液進行誘導培養(yǎng),對照組的培養(yǎng)液為含10﹪FBS的DMEM.每天光鏡下觀察單層誘導和未誘導的骨髓間充質(zhì)干細胞形態(tài)學的改變,培養(yǎng)三天后免疫組化、原位雜交和RT-PCR等方法檢測膠原和糖蛋白的體外表達情況;骨髓間充質(zhì)干細胞-脫鈣骨復合物誘導實驗組和未誘導對照組體外培養(yǎng)6天,回植到裸鼠皮下,分別于2、4、6、8、10周取材.石蠟切片兔疫

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