胃癌腹膜轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白Myosin--9促進(jìn)胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)2011級博士學(xué)位論文胃癌腹膜轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白Myosin一9促進(jìn)胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移Peritonelmetastasisassociatedprotein】V【yosin一9inducesmigrationandinVasionofgastriccancer課題來源：自選課題學(xué)位申請人導(dǎo)師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學(xué)院答辯委員會主席答辯委員會委員張磊李國新教授外科學(xué)學(xué)術(shù)型博士研究生第一臨床醫(yī)學(xué)院蘭平教授_一l。7、1，～雷

2、建教授張玉新教授黃宗海教授黃祥成教授2014年5月21日廣州摘要是以雙相凝膠電泳(Twodimension2Llp01yac巧一l觚lidegelelec仃ophoresis，2DE)為主的蛋白質(zhì)分離技術(shù)和以質(zhì)譜(maSsspec仃ome仃y，MS)、生物信息學(xué)(Bioinfonnatics)為主的蛋白質(zhì)鑒定技術(shù)。目前已經(jīng)有許多新的差異蛋白質(zhì)組分析方法用于實踐，其中熒光差異凝膠電泳(di毹rencegelelec仃ophoresis，D

3、IGE)技術(shù)由于繼承了二維凝膠電泳(似odimensionalelec仃ophoresis，2DE)的高分辨率，同時又具備高重現(xiàn)性、高靈敏度、高通量和高動態(tài)范圍等優(yōu)勢，使得DIGE日益受到關(guān)注，成為最受歡迎的定量蛋白質(zhì)組學(xué)研究手段之一。DIGE技術(shù)通過對用不同的熒光染料對不同的蛋白樣品進(jìn)行標(biāo)記，在同一塊雙向凝膠中可同時分離多種蛋白樣品，并且每塊膠上均引入了內(nèi)標(biāo)，內(nèi)標(biāo)可以進(jìn)一步增加可信度，確保結(jié)果能反映出真實的生物學(xué)差異，避免了系統(tǒng)誤差對

4、實驗結(jié)果的影響。目前，蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)已在多種腫瘤中用于篩選和鑒定同早期診斷、預(yù)后以及化療敏感性等相關(guān)的腫瘤標(biāo)記物。綜上所述，本課題主要關(guān)注的是尋找同胃癌腹膜轉(zhuǎn)移相關(guān)的蛋白質(zhì)，并選擇其中一個差異蛋白進(jìn)行進(jìn)一步的功能驗證和機制的初步研究。實驗的第一部分使用2DDIGE分離結(jié)合MALDITOF／TOF質(zhì)譜對胃癌組織和相應(yīng)腹膜轉(zhuǎn)移組織的差異表達(dá)蛋白質(zhì)進(jìn)行篩選鑒定，共鑒定出27種蛋白質(zhì)。其中在胃癌腹膜轉(zhuǎn)移組織中表達(dá)上調(diào)的有23個蛋白質(zhì)，表達(dá)下調(diào)的

5、有4個蛋白質(zhì)，這為今后研究奠定了基礎(chǔ)。然后利用生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)在上述這些差異蛋白中，Myosin9蛋白可能在肌動蛋白細(xì)胞骨架重組、肌動蛋白纖維運動、血管生成、細(xì)胞細(xì)胞間黏附以及蛋白轉(zhuǎn)運等生物過程中發(fā)揮重要作用，根據(jù)以上結(jié)果我們推測Myosin9可能參與了胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移過程。因此第二和第三部分我們對Myosin9進(jìn)行了更深入的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)抑制Myosin9的表達(dá)后，細(xì)胞的遷移和侵襲能力減弱，而粘附能力增加，裸鼠腹腔播散腫瘤結(jié)節(jié)形成數(shù)