CD133通過上皮間質轉化促進胃癌侵襲和轉移的實驗研究.pdf

1、目的：
　　觀察胃癌細胞CD133表達及上皮間質轉化(EMT)相關因子與胃癌侵襲轉移的關系，進一步探討CD133是否經(jīng)EMT促進胃癌侵襲與轉移。
　　材料與方法：
　　通過免疫磁珠分選技術，將KATO-III細胞分為CD133+組和CD133—組，利用Transwell小室法檢測侵襲能力，Western blot和RT-PCR方法檢測EMT相關因子的表達差異以及siRNA誘導CD133基因沉默后EMT相關因子表達的改變

2、；Western blot方法檢測50例胃癌組織CD133和EMT相關因子的表達，并研究兩者相關性及與胃癌臨床病理特征和預后的關系。
　　結果：
　　CD133+ KATO-III細胞組穿膜細胞數(shù)(67.66±10.47)顯著高于CD133—組(13.33±6.76，P=0.001)，CD133+組中Snail、N-cadherin mRNA表達相對灰度值為0.311±0.015、0.581±0.020顯著高于CD133—組

3、(0.223±0.016，P=0.04；0.270±0.018，P=0.004)；CD133+組中Snail、N-cadherin蛋白表達相對灰度值為0.513±0.015、0.538±0.028，顯著高于CD133—組(0.179±0.023，P=0.03;0.202±0.032，P=0.02)；CD133+組中E-cadherin mRNA及蛋白表達相對灰度值分別為0.231±0.009、0.426±0.030，顯著低于CD133—

4、組(0.460±0.015，P=0.04;0.748±0.027，P=0.04)。siRNA干擾CD133基因表達后，KATO-III細胞穿膜細胞數(shù)顯著降低(P<0.05)，Snail、N-cadherin mRNA表達相對灰度值為0.410±0.009和0.136±0.009，顯著低于空白對照組(0.621±0.010，P=0.04；0.685±0.018，P=0.01)。Snail、N-cadherin蛋白表達相對灰度值為0.157

5、±0.013和0.217±0.023，顯著低于空白對照組(0.513±0.015，P=0.02;0.538±0.028，P=0.03)；而與空白對照組相比(0.279±0.009,0.648±0.027)，E-cadherin mRNA及蛋白表達相對灰度值明顯增高(0.658±0.001，P=0.01;0.426±0.030,P=0.03)。胃癌組織中Snail及N-cadherin蛋白的表達與CD133表達呈正相關(P<0.05)，E