微針陣列給藥技術(shù)用于增生性瘢痕治療的研究.pdf

1、目的：觀察微針陣列作用后，促透曲安奈德對增生性瘢痕（hypertrophic scar,HS）的治療效果，探索增生性瘢痕微創(chuàng)給藥的新途徑。
　　方法：建立人增生性瘢痕裸鼠模型：將人HS組織分別移植在24只裸鼠體表，觀察移植后瘢痕組織結(jié)構(gòu)和成活情況。離體瘢痕：經(jīng)微針陣列處理后的人離體增生性瘢痕，亞甲藍(lán)染色后，觀察微孔的分布和排列，石蠟切片HE染色觀察微孔深度、寬度、密度。洗脫法、勻漿法分別考察給藥1h、12 h增生性瘢痕皮膚醋酸曲安

2、奈德在體吸收特性；經(jīng)皮水分流失（TEWL）測量法、激光多普勒血流量法考察其皮膚刺激性。在體瘢痕：將人增生性瘢痕移植建立裸鼠增生性瘢痕模型，應(yīng)用醋酸曲安奈德乳膏進(jìn)行藥效學(xué)實驗，分為直接涂布給藥組、微針促透給藥組和注射組，分別在15d、30d、45d、60d通過瘢痕組織免疫組化觀察瘢痕內(nèi)的α-SMA表達(dá)、免疫組化染色CD34檢測血管密度和TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡方面的變化，用圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果：24只裸鼠移植人HS

3、后，22只出現(xiàn)明顯的HS（91.66％），明顯高于周圍正常組織，表面粗糙，充血明顯，質(zhì)地堅硬，組織內(nèi)膠原束排列紊亂，膠原纖維致密，可見大量微血管。離體瘢痕經(jīng)長度250μm、500μm和1000μm微針陣列處理后，500μm微針陣列組可見微孔排列均勻，深度已穿透角質(zhì)層達(dá)到表皮棘細(xì)胞層，平均深度、寬度和針孔數(shù)量分別為89±32μm、48±9μm和76±2μm，較其他兩組更適合在體瘢痕給藥。微針處理1、12h后，27.42%、60.64%藥物

4、分別吸收進(jìn)入皮膚，促透作用分別為3.43、2.51倍。皮內(nèi)注射給藥12 h后皮膚中藥物滯留量仍然最高，但較給藥1h下降45.98%；而微針、直接涂布乳膏分別較給藥1 h增加5.46、4.18倍；微針對皮膚中藥物滯留量的促透作用為3.56倍。皮內(nèi)注射12 h皮膚中藥物滯留量分布并不均勻，均值為（4.83±5.51）μg，微針處理12h均值僅為（0.93±0.14）μg，但分布卻相對均勻。TEWL測量法顯示微針給藥與皮內(nèi)注射的皮膚刺激性無顯

5、著性差異，但激光多普勒血流量法顯示皮內(nèi)注射的皮膚刺激性是微針給藥的8.40倍。裸鼠瘢痕模型經(jīng)藥效學(xué)實驗后，通過免疫組化EnVision法染色CD34觀察到30d、45d、60d時微針組和注射組血管數(shù)目低于涂布組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。瘢痕內(nèi)α-SMA陽性表達(dá)注射組明顯低于涂布組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；而微針組在15d以后的時段才比涂布組陽性表達(dá)顯著減少（P<0.05），45d和60d后降至注射組水平。瘢痕組織內(nèi)