微針陣列經(jīng)皮促透NGF用于皮膚感覺重建治療的研究.pdf

1、目的:觀察微針陣列作用后，神經(jīng)生長因子（Nerve growth factor，NGF）經(jīng)皮給藥的分布、皮內(nèi)和血漿藥物濃度，探索NGF促進(jìn)移植皮膚感覺恢復(fù)的微創(chuàng)給藥方法。
　　方法:離體兔皮：用亞甲藍(lán)染色法觀察微針陣列處理后微孔的分布和排列，冰凍切片HE染色法觀察和測量微孔的深度和直徑。在體研究：建立兔皮片移植模型，采用直接涂布、微針促透涂布和皮內(nèi)注射給藥，Elisa法檢測給藥6h后皮膚勻漿液和1h~6h血漿內(nèi)NGF的含量，免疫組

2、化染色法觀察皮膚組織切片中NGF的分布和神經(jīng)纖維再生的情況。
　　結(jié)果:離體兔皮經(jīng)長度250μm、500μm和1000μm，直徑150μm的微針陣列處理后，1000μm微針陣列組可見排列均勻的微孔，針道穿透角質(zhì)層達(dá)到真皮淺層，平均深度、寬度和針孔數(shù)量分別為174±81μm、69±14μm和32±1，250μm和500μm微針陣列組微孔的平均深度和數(shù)量低于1000μm微針陣列組；皮片移植兔的在體研究顯示，給藥6h后，皮內(nèi)注射組和微針

3、促透組的皮膚組織勻漿液中NGF含量分別是22.74％和19.36%，兩組比較差異無顯著性意義(P>0.05)，但較直接涂布組(3.52%)分別高出6.46倍和5.50倍(均P<0.05)。血漿NGF峰值濃度分別是84.13±10.61pg/ml和41.69±10.7pg/ml，兩組比較差異有顯著性意義(P<0.05)，但微針陣列促透組較皮內(nèi)注射組持續(xù)時(shí)間長且含量穩(wěn)定，直接涂布組(10.91±2.35pg/m)含量較低。免疫組化染色顯示，

4、微針促透組的真皮組織中有大量NGF存在，且分布均勻，,越靠近角質(zhì)層含量越高；皮內(nèi)多點(diǎn)注射組,注射點(diǎn)周圍皮膚有大量的NGF聚集，分布不均勻；直接涂布給藥組,NGF主要停留在皮膚角質(zhì)層的表面,毛囊和腺體中有少量分布。給藥30天后，移植皮膚S100免疫組化染色顯示，微針促透組和皮內(nèi)注射組可以誘導(dǎo)皮膚神經(jīng)再生，直接涂布組未看到再生的神經(jīng)纖維。
　　結(jié)論:通過微針陣列在皮膚上形成的微通道，可使NGF順利透過角質(zhì)層到達(dá)真皮層，實(shí)現(xiàn)對(duì)NGF微創(chuàng)