殼聚糖及其化學改性產物誘導微血管再生的研究.pdf

1、近年來，組織工程學研究取得了顯著進展，同時也對研究未來的發(fā)展和走向提出了新的課題。移植的人工組織如何更好的與宿舍體內環(huán)境契合、獲得良好的存活、生長和愈后效果，成為國內外研究者關注的重點。首先，要保證移植組織在宿主體內的存活，移植組織，尤其是大體積組織的血管化就成為必須要解決的課題。前人已有很多關于微血管發(fā)生機制的研究，為探索促進血管化的道路提供了線索。研究表明血管的發(fā)生是一系列基因表達調控的結果，而如何激活這些基因的表達，則是組織工程要

2、做的工作?？赡馨l(fā)揮作用的信號包括化學信號、物理信號和生物學信號等等。曾有研究表明，在生物體本身的組織損傷修復過程中會產生直流電場，且外加的反向或增強電場，對損傷修復產生影響。那么，電信號對于微血管的發(fā)生是否存在影響？電荷性生物材料用于組織工程的效果又將如何？天然有機化合物殼聚糖因其良好的組織相容性及良好的生物活性受到生物材料研究工作者們的青睞，前人對殼聚糖及其不同改性產物的研究亦已有很多，但尚未有從電性角度對比殼聚糖及其帶不同電性的修飾

3、產物在組織修復中的作用的相關研究。
　　 本文采用殼聚糖及其改性修飾產物羧甲基殼聚糖（帶負電）及季銨化殼聚糖（帶正電）為材料，首先對三種材料進行相關表征，并使用三種化合物制備凍干材料進行后續(xù)研究。通過SEM掃描電鏡、孔徑及孔隙率測算等方法了解三種電性的凍干材料的三維結構。本文使用三種化合物的凍干材料在體內及體外進行了MTT試驗、皮下埋植術后取材的HE染色、Masson染色等實驗，評價不同電性的三種材料的細胞相容性及對微血管形成的

4、影響。最后，本文中分別制備了VEGF結合的三種電性的凍干材料，使用該材料進行控釋實驗及通過HE染色評價該材料對微血管生成的影響。并通過VEGF結合組的實驗結果與單純凍干材料組的實驗結果對比，對電性可能影響微血管生成的方式做初步探索。
　　 實驗結果顯示，體外進行的細胞相容性實驗中，負電性的材料表現(xiàn)優(yōu)于其他兩種材料，而帶正電的材料表現(xiàn)最差。然而在體內實驗中，盡管帶正電的材料的白細胞計數(shù)始終顯著高于其他兩組，但在促進微血管形成方面，

5、它仍顯示出優(yōu)于電中性殼聚糖材料的效果。帶負電性的材料在體內及體外實驗中都顯示出較好的細胞相容性和對微血管生成的促進作用。VEGF結合的凍干材料的控釋中，負電性材料具有較為持久的緩釋作用，正電性材料和電中性材料呈現(xiàn)較為明顯的突釋現(xiàn)象。VEGF結合的凍干材料進行的對血管計數(shù)結果也表現(xiàn)出與釋放曲線相符的變化趨勢。
　　 本文得出結論為負電性材料的血管化及組織再生性能最好，與VEGF的結合的能力可能是影響負電性材料對于微血管生成促進作用