內(nèi)蒙古地區(qū)牛傳染性鼻氣管炎病毒的分離與鑒定.pdf

1、本試驗(yàn)從內(nèi)蒙古自治區(qū)6個(gè)地區(qū)的奶牛場(chǎng)和奶牛養(yǎng)殖戶采集了429份牛血清，并對(duì)這些血清利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒進(jìn)行牛傳染性鼻氣管炎(IBR)檢測(cè)。結(jié)果顯示，在所調(diào)查地區(qū)的奶牛群中存在著不同程度的牛傳染性鼻氣管炎病毒感染(IBRV)，最高感染率達(dá)92.00％，最低的僅為2.78％，平均感染率為46.62％。 從呼和浩特地區(qū)采集了14份疑似IBR的病料，將這些病料利用PCR法進(jìn)行IBRV檢測(cè)，有4份病料擴(kuò)增出了IBRV的特異性片段(3

2、39bp)。將4份病料處理后接種犢牛睪丸細(xì)胞傳代培養(yǎng)，分離病毒，在盲傳到第7代時(shí)，接種采自疑似IBR流產(chǎn)胎牛實(shí)質(zhì)臟器病料的細(xì)胞出現(xiàn)圓縮、聚集成葡萄樣群落、在單層細(xì)胞上形成空洞、有時(shí)會(huì)發(fā)現(xiàn)有數(shù)個(gè)細(xì)胞核的巨大細(xì)胞、在48～72h即完全出現(xiàn)病變并脫落等病變，且隨著傳代次數(shù)的增加，CPE更加規(guī)律。而其余三份病料接種細(xì)胞后均未分離到病毒。將病毒一直傳代到第11代，然后對(duì)所分離病毒進(jìn)行。TCID<,50>測(cè)定、理化特性鑒定、血清中和試驗(yàn)以及PCR鑒