V-,γ-1和V-,γ-4-,γ-δT細胞亞群在抗腫瘤免疫反應中的作用及機制初探.pdf

1、第三軍醫(yī)大學博士學位論文V1和V4δT細胞亞群在抗腫瘤免疫反應中的作用及機制初探姓名：賀偉峰申請學位級別：博士專業(yè)：外科學（燒傷）指導教師：吳軍20061101第三軍醫(yī)大學博士學位論文通路，激活面產(chǎn)生IFN丫。作為鏈接天然免疫和獲得性免疫反應橋梁，y6T細胞是否能夠通過非特異性的細胞因子受體通路激活產(chǎn)生IFNl以及perforin尚未見報道。另外，這兩種方式中，哪一種方式在y6T細胞抗腫瘤作用中發(fā)揮更重要作用也是一個值得探討的問題。闡明

2、這些問題不僅能使我們更好的理解丫6T細胞在腫瘤免疫監(jiān)視的作用以及所涉及的分子機制，而且也有助于我們進一步發(fā)展新的抗腫瘤免疫治療方案。我們將本項目研究獲得的主要結(jié)果和結(jié)論歸納如下：一、Vy4Y6T細胞有強烈的抑制腫瘤形成和生長作用，但在野生型小鼠體內(nèi)該細胞抗腫瘤作用可能被其他細胞調(diào)節(jié)，處于抑制狀態(tài)；而Vyl5T細胞并不直接影響腫瘤的形成和生長，但能通過調(diào)節(jié)其他免疫細胞的抗腫瘤功能來發(fā)揮其負調(diào)功能。①抗體清除試驗為了確定Vyl和Vy4忙T細

3、胞各自在抗腫瘤免疫反應中的作用，性別和年齡匹配的B6小鼠分別用VI一清除性抗體(211)或Ⅵ4一清除性抗體(uc3)或PBS對照(n=15每組)在一5天和一1天進行靜脈注射，然后在第0天，在小鼠皮下種植B16F0腫瘤細胞(2105／每只小鼠)。注射V丫l或Vy4抗體后能完全清除V丫l或Vy4Y6T細胞并能保持這種清除狀態(tài)至少3周。對比野生型小鼠，Vyl細胞清除小鼠腫瘤形成明顯延后以及腫瘤生長明顯減緩(P005)。然而V似細胞清除小鼠卻與

4、野生型小鼠腫瘤形成時間及腫瘤生長速度無明顯差異。②重建試驗為了進一步確定Vy4yc5T細胞抗腫瘤作用以及VI／8T細胞無促進腫瘤生長作用，性別和年齡匹配的B6TCR6鏈缺陷小鼠分別通過靜脈輸入流式細胞儀分選的Vyl或V丫4Y6T細胞(1105／每只小鼠)(n=6)，第二天在皮下種植B16F0黑色素瘤細胞(2x105／每只小鼠)，并觀察腫瘤的形成時間。與上面的清除試驗結(jié)果相契合，對比TCR6鏈缺陷小鼠，V一丫6T細胞的重建小鼠腫瘤形成時間

5、明顯延后(pO05)。然而Vyly6T細胞重建小鼠同樣與TCR6鏈缺陷小鼠腫瘤形成時間沒有明顯不同。二、自發(fā)性激活型Vyl丫6T細胞在體外培養(yǎng)激活后產(chǎn)生低水平的IFN丫，并且在體內(nèi)重建試驗中表現(xiàn)出不直接影響腫瘤形成和生長；而初始型V丫1丫6T細胞在體外培養(yǎng)激活后產(chǎn)生高水平的IFN丫，并且在體內(nèi)重建試驗中表現(xiàn)出一定的抗腫瘤保護作用；因而表明不同于效應Vyl丫6T細胞，自發(fā)性激活型Vyl丫6T細胞是一類具有獨特功能的丫6T細胞甄群。提示可能