哮喘大鼠基因的動(dòng)態(tài)變化及三氧化二砷的干預(yù)研究.pdf

1、目的：
　　利用全基因表達(dá)譜芯片技術(shù)觀(guān)察哮喘大鼠和應(yīng)用三氧化二砷干預(yù)后不同時(shí)間點(diǎn)的基因差異表達(dá)的變化，闡明哮喘的發(fā)病機(jī)制和三氧化二砷治療哮喘的分子機(jī)制。
　　方法：
　　健康雄性清潔級(jí)SD大鼠70只，按隨機(jī)表隨機(jī)分成3組：正常對(duì)照組A組10只，哮喘模型組B組30只(分別為二周B1組、四周B2組、八周B3組，每組各10只），三氧化二砷干預(yù)組C組30只(分別為二周C1組、四周C2組、八周C3組，每組各10只）。以腹腔內(nèi)注射

2、聯(lián)合霧化吸入卵蛋白建立哮喘模型，末次激發(fā)后24h處死大鼠檢測(cè)支氣管肺泡灌洗液（BALF）中的白細(xì)胞數(shù)及嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)；左肺行染色、病理圖像分析；再切取右肺提取肺組織總 RNA行全基因組表達(dá)譜芯片檢測(cè)，以基因表達(dá)倍數(shù)值2.0和基因表達(dá)倍數(shù)值－2.0為閾值來(lái)確定差異表達(dá)基因，然后用GO及Pathway分析對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行功能分類(lèi)分析，并對(duì)基因芯片結(jié)果進(jìn)行實(shí)時(shí)定量PCR驗(yàn)證。
　　結(jié)果：
　　1、哮喘模型組 BALF中白細(xì)胞總數(shù)

3、、嗜酸性粒細(xì)胞（Eos）比例較正常組均有明顯增高，三氧化二砷組較哮喘模型組明顯降低，差異有顯著性(P<0.05)。
　　2、哮喘模型組大鼠氣道支氣管及血管周?chē)嬖诖罅垦装Y細(xì)胞浸潤(rùn)，以嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞為主，氣道平滑肌增厚，基底膜增厚，管腔狹窄，粘膜下細(xì)胞外基質(zhì)沉積，且隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，以上變化逐漸加重；三氧化二砷組較哮喘模型組上述改變減輕，正常組無(wú)上述改變。
　　3、在24358個(gè)基因表達(dá)譜的篩選中，哮喘模型組對(duì)比正常組共

4、有438個(gè)差異基因表達(dá)，其中348個(gè)上調(diào)，90個(gè)下調(diào)；三氧化二砷組對(duì)比哮喘模型組共有236個(gè)基因表達(dá)差異，其中96個(gè)上調(diào)，140個(gè)下調(diào)。其中GZMA、MAL基因在哮喘模型組中表達(dá)下調(diào)，三氧化二砷干預(yù)組后表達(dá)上調(diào)，通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR驗(yàn)證后與基因芯片篩選結(jié)果表達(dá)方向一致。
　　結(jié)論：
　　1、GZMA、MAL等基因可能參與了哮喘的發(fā)生發(fā)展過(guò)程。
　　2、三氧化二砷治療哮喘的機(jī)理可能與上調(diào)GZMA、MAL基因在肺組織中的表達(dá)