酶解馬鈴薯蛋白及其飼喂效果研究.pdf

1、研究胃蛋白酶和胰蛋白酶體外酶解馬鈴薯蛋白的最適酶解參數(shù)。在此基礎(chǔ)上，通過考察酶解產(chǎn)物對斷奶仔豬生產(chǎn)性能、腸道形態(tài)與發(fā)育、血液指標(biāo)的影響評價其在斷奶仔豬上的飼喂效果。 試驗一：蛋白酶體外酶解馬鈴薯蛋白適宜酶解參數(shù)研究 為了確定胃蛋白酶和胰蛋白酶體外酶解馬鈴薯蛋白的最適酶解參數(shù)。先做溫度梯度試驗確定胃蛋白酶和胰蛋白酶酶解馬鈴薯蛋白的最適酶解溫度（溫度梯度設(shè)為40、45、50、55℃）；再通過L9（34）不完全正交試驗分別確定

2、兩種酶對馬鈴薯蛋白的最適反應(yīng)條件（胃蛋白酶初始pH設(shè)為0．8/1．8/2．8三個水平、酶濃度設(shè)為1000/3000/5000U/g原料三個水平；胰蛋白酶初始pH設(shè)為7．0/8．0/9．0三個水平、酶濃度設(shè)為200/350/500U/g原料三個水平，兩種酶的反應(yīng)時間均設(shè)為15/25/35h三個水平）；最后進(jìn)行雙酶聯(lián)合水解研究（先用胃蛋白酶處理或先用胰蛋白酶處理，胃蛋白酶的用量始終被固定在2000U/g底物，胰蛋白酶的用量分別被設(shè)為最佳酶濃

3、度的1/4、1/2、3/4）。試驗結(jié)果顯示胃蛋白酶和胰蛋白酶單酶酶解馬鈴薯蛋白的最優(yōu)條件分別是仞始pH=1．8和9．0、溫度為50和45℃、酶濃度為5000和500U/g底物、反應(yīng)時間均為35小時。聯(lián)合酶解最優(yōu)條件為：先用胰蛋白酶在初始pH=9．0、溫度為45℃、酶濃度為250U/g原料的條件下酶解20h，再用胃蛋白酶在pH=1．8、溫度為50℃、酶濃度為2000U/g原料的條件下酶解15h，加堿調(diào)pH至中性可得最終產(chǎn)品。測得產(chǎn)品水解度

4、為9．86％，TCA-NSI為49．28％，Gln得率為86．39％，分子量小于1kDa的肽中Gln含量為1．73％，分子量大于1kDa小于0．45μm的肽中Gln含量為4．12％，肽中Gln總含量為5．85％，未檢測到還原糖。 試驗二：馬鈴薯蛋白體外酶解產(chǎn)物在斷奶仔豬上的飼喂效果研究 在試驗一的基礎(chǔ)上，為了評價酶解馬鈴薯蛋白在斷奶仔豬上的飼喂價值，試驗采用單因子試驗設(shè)計，選擇26±2日齡初始體重7．38±0．66kg斷

5、奶仔豬28頭，分到4個處理組中，每個處理7個重復(fù)，每個重復(fù)1頭豬。用5％未酶解馬鈴薯蛋白、5％酶解馬鈴薯蛋白和5％血漿蛋白等能等氮代替對照日糧中的豆粕。試驗期14天，分別在試驗第1、8、15天清晨空腹稱重后采血10ml；第15天，每個處理選擇6頭仔豬放血殺豬取腸道組織切片樣和腸道粘膜樣。試驗結(jié)果表明： ①酶解組較對照組和未酶解組能提高第一周ADG、ADFI，并降低F/G，其中酶解組第一周ADG顯著高于對照組（P<0．05）。在第

6、二周和全期，酶解組、對照組和未酶解組的生產(chǎn)性能相當(dāng)，差異不顯著（P>0．05）。血漿蛋白組在各個階段都能顯著或極顯著提高仔豬ADFI、ADG，并降低F/G（P<0．05或P<0．01）。 ②與其它所有處理組相比，酶解組都能顯著或極顯著提高小腸各腸段絨毛高度（P<0．05或P<0．01），極顯著降低各腸段粘膜隱窩深度（P<0．01）。 ③與其它所有處理組相比，酶解組都顯著提高空腸和回腸粘膜中蛋白質(zhì)含量（P<0．05）；酶解

7、組較對照組和血漿蛋白組能顯著或極顯著提高腸粘膜DNA濃度；雖然酶解組也有提高腸道RNA濃度的趨勢，但各處理組之間差異不顯著（P>0．05）。 ④酶解組較其它所有處理組都能極顯著提高腸粘膜SIgA含量（P<0．01），但腸粘膜Gln含量的差異并不顯著（P>0．05）。 ⑤與對照組和血漿蛋白組相比，酶解組和未酶解組（特別是酶解組）都能顯著或極顯著提高血清總蛋白含量、球蛋白含量、血清Glu含量，降低血清A/G；也提高了血清尿素