布氏桿菌生物膜的形成及其特性的初步探究.pdf

1、布氏桿菌病(Brucellosis)是由布氏桿菌（Brucella）引起的一種人獸共患的慢性傳染病。該病可危害全身各個系統具有潛在的致命性，是一種自然疫源性疾病。布氏桿菌病在世界各地分布廣泛，常常引起不同程度的流行，不但危害畜牧業(yè)的生產發(fā)展，而且嚴重損害人類的健康。生物膜是指細菌為了適應周圍不良的生活環(huán)境，吸附于惰性物體或活性實體表面，迅速生長繁殖并分泌出大量的多糖基質、纖維蛋白、脂蛋白等蛋白多糖復合物，促使細菌之間相互黏連成結構性群落

2、的膜樣物質，是一種與浮游細菌相對應的生活方式。生物膜的形成是一個動態(tài)過程，其主要特征是結構上和生理上的不均質性。生物膜的特殊結構促使細菌可以耐受冷熱、消毒劑和抗生素等而得以生存，造成人和動物的持續(xù)感染和重復感染。因此研究生物膜具有重要的臨床和實踐意義。
　　本研究首先采用微孔板定量檢測法測定布氏桿菌菌株S2生物膜的形成，結合結晶紫染色法確定了S2形成生物膜的最佳時間為6d。隨后通過試管法、普通顯微鏡觀察法和掃描電子顯微鏡檢測法觀察

3、布氏桿菌生物膜的形成，結果顯示:布氏桿菌能夠在試管的氣液交界面上形成生物膜，經結晶紫染色后可以清楚地看到生物膜的形成;普通顯微鏡下可以直接觀察生物膜的結構;通過掃描電子顯微鏡觀察布氏桿菌生物膜的形成過程，在黏附期細菌開始聚集在一起形成菌落，此時只有少量的胞外聚合物包裹，所以沒有形成成熟的生物膜。隨著細菌大量的生長繁殖，分泌大量的胞外基質，將細菌緊緊黏連在一起，加厚生物膜的結構。處于成熟期的細菌生物膜的結構較為復雜，掃描電鏡觀察可見片狀或

4、者簇狀的菌落，被細菌自身所分泌的黏液狀物包裹在一起，形成凹凸不平的致密膜樣結構。細菌之間相互聯系，其間可見營養(yǎng)物質和水分流動以及交換的通道結構，還可以看到一些黏液絲。
　　另外，利用布氏桿菌的敏感抗生素:硫酸鏈霉素、莫西沙星、硫酸慶大霉素和卡那霉素，測定其對布氏桿菌生物膜態(tài)和浮游態(tài)的最小殺菌濃度(MBC)。實驗過程中首先要利用96孔細胞板培養(yǎng)法誘導細菌形成生物膜，然后再去測量抗生素對生物膜態(tài)細菌的最小殺菌濃度。對比發(fā)現，在這四種抗