冷鮮肉中細菌生物膜的形成及其清除特性研究.pdf

1、冷鮮肉作為目前主要的并且市場占有率呈遞增趨勢的豬肉銷售方式，其肉品生產加工鏈中潮濕且富含營養(yǎng)的表面為微生物繁殖和生物膜的形成提供了良好的環(huán)境。相比不具有生物膜形成能力的細菌，具有生物膜形成能力的細菌通常可以更牢固的粘附于不銹鋼、玻璃材質的設備和器具表面，難以清除從而引發(fā)食品污染的安全隱患。
　　本文主要研究市售冷鮮肉中混合菌群的成膜特性，以冷鮮肉淋洗液為培養(yǎng)基質，探究不同材質、溫度、培養(yǎng)時間影響下的細菌生物膜形成情況。從培養(yǎng)成熟的

2、細菌生物膜中分離出成膜能力較強的細菌，并采用16s RNA測序比對方法鑒定細菌種類。采用次氯酸鈉清洗劑結合超聲波清除細菌生物膜，模擬工業(yè)生產冷鮮肉的低溫條件下對有害的細菌生物膜的清除，效果顯著。主要研究結果如下:
　　(1)對采集自超市冷柜的冷鮮肉細菌總數進行測定結果為2.6×105cfu/g，低于國標。以冷鮮肉淋洗液為培養(yǎng)基質，原有的混合菌群為實驗對象，進行生物被膜形成研究。培養(yǎng)時間對生物膜的形成具有顯著影響，在4℃下，生物被膜

3、的生成量逐漸增加第6天時達到峰值，顯著地高于其它培養(yǎng)時間。在混合菌液的接觸面類型玻璃與不銹鋼片表面，生物膜的形成量沒有明顯差異。溫度對生物膜的形成具有顯著影響，4℃下培養(yǎng)6天最佳的生物膜形成量與26℃下無顯著差異，但顯著高于15℃條件下的生物膜形成量。
　　(2)從成熟生物膜中分離純化出細菌菌株.從200余株疑似具有單獨成膜能力的細菌菌株中，篩選出具有強成膜能力的九株細菌，其相對成膜能力SBF均大于1。通過16SRNA序列比對，結

4、果顯示為其中有一株假單胞菌，一株成團泛菌，兩株變形桿菌，五株腐敗希瓦氏菌。
　　(3)化學清洗劑次氯酸鈉溶液以及超聲波清除處理對玻璃試管內壁形成的生物被膜的生物活性均具有極顯著的清除滅活作用，清除效果明顯。超聲波單獨作用時對玻璃表面和不銹鋼表面生物被膜的清除效率分別是60％與50％。次氯酸鈉溶液對生物被膜的清除效果均達到90％以上，且濃度為200ppm、400ppm、600ppm之間的清除率無明顯差異。單獨的次氯酸鈉溶液的清除效果