冷鮮肉中細(xì)菌生物膜的形成及其清除特性研究.pdf

1、冷鮮肉作為目前主要的并且市場(chǎng)占有率呈遞增趨勢(shì)的豬肉銷售方式，其肉品生產(chǎn)加工鏈中潮濕且富含營養(yǎng)的表面為微生物繁殖和生物膜的形成提供了良好的環(huán)境。相比不具有生物膜形成能力的細(xì)菌，具有生物膜形成能力的細(xì)菌通?？梢愿喂痰恼掣接诓讳P鋼、玻璃材質(zhì)的設(shè)備和器具表面，難以清除從而引發(fā)食品污染的安全隱患。
　　本文主要研究市售冷鮮肉中混合菌群的成膜特性，以冷鮮肉淋洗液為培養(yǎng)基質(zhì)，探究不同材質(zhì)、溫度、培養(yǎng)時(shí)間影響下的細(xì)菌生物膜形成情況。從培養(yǎng)成熟的

2、細(xì)菌生物膜中分離出成膜能力較強(qiáng)的細(xì)菌，并采用16s RNA測(cè)序比對(duì)方法鑒定細(xì)菌種類。采用次氯酸鈉清洗劑結(jié)合超聲波清除細(xì)菌生物膜，模擬工業(yè)生產(chǎn)冷鮮肉的低溫條件下對(duì)有害的細(xì)菌生物膜的清除，效果顯著。主要研究結(jié)果如下:
　　(1)對(duì)采集自超市冷柜的冷鮮肉細(xì)菌總數(shù)進(jìn)行測(cè)定結(jié)果為2.6×105cfu/g，低于國標(biāo)。以冷鮮肉淋洗液為培養(yǎng)基質(zhì)，原有的混合菌群為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，進(jìn)行生物被膜形成研究。培養(yǎng)時(shí)間對(duì)生物膜的形成具有顯著影響，在4℃下，生物被膜

3、的生成量逐漸增加第6天時(shí)達(dá)到峰值，顯著地高于其它培養(yǎng)時(shí)間。在混合菌液的接觸面類型玻璃與不銹鋼片表面，生物膜的形成量沒有明顯差異。溫度對(duì)生物膜的形成具有顯著影響，4℃下培養(yǎng)6天最佳的生物膜形成量與26℃下無顯著差異，但顯著高于15℃條件下的生物膜形成量。
　　(2)從成熟生物膜中分離純化出細(xì)菌菌株.從200余株疑似具有單獨(dú)成膜能力的細(xì)菌菌株中，篩選出具有強(qiáng)成膜能力的九株細(xì)菌，其相對(duì)成膜能力SBF均大于1。通過16SRNA序列比對(duì)，結(jié)

4、果顯示為其中有一株假單胞菌，一株成團(tuán)泛菌，兩株變形桿菌，五株腐敗希瓦氏菌。
　　(3)化學(xué)清洗劑次氯酸鈉溶液以及超聲波清除處理對(duì)玻璃試管內(nèi)壁形成的生物被膜的生物活性均具有極顯著的清除滅活作用，清除效果明顯。超聲波單獨(dú)作用時(shí)對(duì)玻璃表面和不銹鋼表面生物被膜的清除效率分別是60％與50％。次氯酸鈉溶液對(duì)生物被膜的清除效果均達(dá)到90％以上，且濃度為200ppm、400ppm、600ppm之間的清除率無明顯差異。單獨(dú)的次氯酸鈉溶液的清除效果