鈦板表面MPC涂層的制備及其對細(xì)菌生物膜形成的影響.pdf

1、目的：探討鈦板表面2-甲基丙烯酰氧基乙基磷酰膽堿(MPC)涂層對金黃色葡萄球菌生物膜形成的影響。
　　方法：1.利用化學(xué)接枝法制備鈦板表面MPC涂層，通過掃描電子顯微鏡觀察其表面形態(tài)。2.以金黃色葡萄球菌(ATCC25923)標(biāo)準(zhǔn)菌株作為實(shí)驗(yàn)用菌，將已消毒的MPC涂層鈦板(實(shí)驗(yàn)組)及普通鈦板(對照組)置入5ml細(xì)菌濃度為1.5×106cfu/ml的菌液中共同培養(yǎng)。通過超聲震蕩-MTT活菌計(jì)數(shù)法檢測24h、48h時(shí)細(xì)菌生物膜內(nèi)活菌數(shù)

2、量。于6、12、24及48h，通過FITC標(biāo)記的刀豆球蛋白A/碘化丙啶(FITC-ConA/PI)進(jìn)行胞外多糖及細(xì)胞核雙染色，激光共聚焦顯微鏡下觀察鈦板表面不同時(shí)間點(diǎn)BF形成及分布情況。利用掃描電子顯微鏡觀察24h、48h實(shí)驗(yàn)組及對照組鈦板表面BF形態(tài)變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。
　　結(jié)果：1.鈦板表面涂層MPC后，掃描電子顯微鏡觀察見鈦板表面形

3、貌光滑，鈦板原先的紋理消失。
　　2.體外培養(yǎng)24、48h時(shí)，實(shí)驗(yàn)組鈦板表面活菌數(shù)量均顯著少于對照組(P<0.05)。
　　3.CLSM觀察發(fā)現(xiàn)對照組鈦板表面于12h就已有菌膜出現(xiàn)，而實(shí)驗(yàn)組鈦板表面于24h才觀察到菌膜的形成，且各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組鈦板表面菌膜形成量均明顯少于對照組。
　　4.SEM觀察發(fā)現(xiàn)24h、48h實(shí)驗(yàn)組鈦板表面細(xì)菌粘附量均明顯少于對照組，且在實(shí)驗(yàn)組鈦板表面菌膜形成量明顯少于對照組。
　　結(jié)論：1