脫細胞腦組織基質(zhì)修復支架體外形態(tài)學和細胞相容性觀察.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察采用脫細胞技術初步研制出來的脫細胞腦組織基質(zhì)修復支架的形態(tài)結構,及其與神經(jīng)干細胞共培養(yǎng)時細胞的生長情況,為研制出理想的腦組織損傷修復支架提供初步的實驗依據(jù)。 方法:①脫細胞腦組織基質(zhì)修復支架制各:運用反復凍融、蛋白酶和 Triton X-100脫細胞,碳環(huán)氧化物交聯(lián)等方法處理成年SD大鼠皮層腦組織,初步制成脫細胞腦組織基質(zhì)修復支架。②修復支架材料的形態(tài)學觀察:分別通過光學顯微鏡和掃描電鏡觀察修復支架材料表面的三維立體構

2、型和內(nèi)部結構特征。③免疫組化分析正常腦組織和修復支架材料內(nèi)細胞外基質(zhì)成分:通過免疫組化的方法對比正常腦組織和脫細胞修復支架材料中三種重要的細胞外基質(zhì)FN、LN和Col Ⅲ的含量和分布情況。④神經(jīng)干細胞與修復支架材料體外共培養(yǎng):取指數(shù)生長期的SD大鼠腦源性神經(jīng)干細胞,通過熒光染料DAPI標記后與修復支架材料體外共同培養(yǎng),倒置相差熒光顯微鏡和掃描電鏡觀察神經(jīng)干細胞生長、增殖、分化以及與修復支架材料的粘附情況。 結果:①成年SD大鼠新

3、鮮腦組織經(jīng)脫細胞處理后,細胞成分已大部分去除,形態(tài)上具有高度仿生的三維立體孔洞結構,孔洞形態(tài)相似,孔徑大小相近,約90μm左右,親水性良好。經(jīng)碳環(huán)氧化物交聯(lián)過后,修復支架材料的生物穩(wěn)定性增強,置于PBS包裝液中長期低溫保存,未出現(xiàn)降解。②免疫組化結果顯示,三種細胞外基質(zhì)在正常腦組織中含量相對偏少,且分布與文獻報道相符,但在修復支架材料中未檢測出來。③修復支架材料與神經(jīng)干細胞體外共培養(yǎng)時,細胞可粘附于材料表面,但粘附力較弱,細胞生長良好,

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