家兔超數(shù)排卵和體外受精技術(shù)的研究.pdf

1、本文主要以41只雌性新西蘭白兔為實(shí)驗(yàn)素材，采用FSH+hCG激素組合進(jìn)行超排處理，比較了FSH不同總劑量，季節(jié)，以及遞減法與恒量法肌注對(duì)超排效果的影響，并分析了不同獲能液，培養(yǎng)液，培養(yǎng)液中L-谷氨酰胺添加量及卵齡對(duì)兔卵母細(xì)胞體外受精和受精卵體外發(fā)育的影響。同時(shí)研究了卵齡對(duì)顯微授精的影響，比較了顯微授精與常規(guī)體外受精效果，結(jié)果如下： 1．不同F(xiàn)SH總劑量超排結(jié)果顯示，60單位與100單位試驗(yàn)組平均排卵點(diǎn)(分別為36.13±8.13

2、個(gè)/只和39.00±9.17個(gè)/只)，平均回收卵子數(shù)(分別為28.88±6.71枚/只和30.67±7.71枚/只)均顯著高于40單位試驗(yàn)組(分別為25.83±4.07個(gè)/只和19.50±4.42枚/只，P<0.05)。但三者卵子平均回收率(分別為75.48％，79.93％和78.63％)之間差異均不顯著(P>0.05)。 2．春季無(wú)論平均排卵點(diǎn)(39.00±9.17個(gè)/只)，平均回收卵子數(shù)(30.67±7.71枚/只)還是卵子

3、平均回收率(78.63％)均顯著高于秋季(21.58±7.10個(gè)/只，15.17±4.97枚/只，70.27％，P<0.05)。 3．用恒量法和遞減法給母兔注射相同總劑量的FSH，兩者之間超排結(jié)果差異不顯著(P>0.05)。 4．DM-His法的8-16細(xì)胞百分率(13.3％)顯著高于DM法與His法(分別為3.4％和3.3％，P<0.05)。DM法，His法及DM-His法三種獲能方法總的卵裂率(分別為51.7％，38

4、.3％和41.3％)之間差異不顯著(P>0.05)，但以DM法效果好些。 5．卵齡14-15h的卵母細(xì)胞體外受精后卵裂率(41.3％)和8-16細(xì)胞百分率(13.3％)均顯著高于卵齡16-17h卵母細(xì)胞(分別為25.0％和2.9％，P<0.05)。 6．在培養(yǎng)液TCM-199+10％FBS中添加L-谷氨酰胺對(duì)卵母細(xì)胞體外受精及受精卵體外發(fā)育具有促進(jìn)作用，但隨著添加量的增加作用減弱，以0.5mmol/L添加量效果最好。

5、 7．培養(yǎng)液DMEM+10％FBS實(shí)驗(yàn)組卵裂率(55.4％)，桑椹胚百分率(21.7％)，囊胚百分率(6.5％)均顯著高于TCM-199+10％FBS組(分別為41.3％，6.7％和0)以及RM-199組(分別為37.9％，5.7％和0，P<0.05)；培養(yǎng)液RM-199組8-16細(xì)胞百分率(25.3％)顯著高于TCM-199+10％FBS組(13.3％，P<0.05)。 8．卵齡19-20h卵母細(xì)胞顯微注射后，注射卵形態(tài)正