供肝缺血預(yù)處理對大鼠冷保存移植肝缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及免疫機(jī)制研究.pdf

1、目的:建立穩(wěn)定可靠的原位肝移植模型，探討供肝熱缺血預(yù)處理對大鼠供肝冷缺血再灌注損傷中的保護(hù)作用及其機(jī)制。 方法:采用SD大鼠原位肝移植動物模型，供肝冷缺血期為120min，受體無肝期20min，隨機(jī)分為3組：假手術(shù)組，獲取供肝前僅作肝臟周圍韌帶的解剖；肝移植組，獲取供肝前不作肝門阻斷；IPC組，獲取供肝前阻斷肝門5min，再灌注5min。術(shù)后2、4、24、72h檢測血清ALT、LDH、抗氧化酶活力、血清NO水平、細(xì)胞因子TNF-

2、a及門靜脈血內(nèi)毒素水平。流式細(xì)胞檢測血清共刺激分子B7.1及B7.2表達(dá)，血清細(xì)胞因子IL-2、IL-10，RT-PCR檢測移植肝組織中TLR2mRNA、NF-κBmRNA及TNF-αmRNA表達(dá)。 結(jié)果:肝移植組及IPC組術(shù)后ALT、LDH及過氧化物含量均明顯高于假手術(shù)組，而且IPC組低于肝移植組，其抗氧化酶活力較移植組明顯升高；NO水平在IPC術(shù)后2、4、24及72h均顯著高于假手術(shù)組，72h時肝移植組明顯高于IPC組及假手

3、術(shù)組，而IPC組高于假手術(shù)組；門靜脈血清中內(nèi)毒素的含量IPC組較移植組明顯降低，但高于假手術(shù)組；肝移植組血清中TNF-α釋放明顯增加，與假手術(shù)組相比差異顯著；IPC組與肝移植組相比顯著地降低TNF-α的釋放。肝移植組及IPC組術(shù)后共刺激分子B7.1及B7.2表達(dá)明顯高于假手術(shù)組，且IPC組低于肝移植組；肝移植組血清中TNF-α釋放明顯增加，與假手術(shù)組相比差異顯著；肝移植組血清IL-2水平在肝移植組明顯高于IPC組，而IL-10水平卻明顯

4、低于IPC組。肝移植組移植肝組織中TLR2mRNA、NF-κBmRNA及TNF-amRNA表達(dá)均高于IPC組，其差異有顯著性。 結(jié)論:供肝熱缺血預(yù)處理對大鼠供肝冷缺血再灌注損傷具有明顯保護(hù)作用，其機(jī)制可能是降低了內(nèi)毒素水平，快速提高了血清中NO水平，且維持在較穩(wěn)定水平，打開了第二保護(hù)窗，抑制了血清TNF-a含量，同時IPC下調(diào)了共刺激分子B7及TLR2mRNA的表達(dá)，降低了NF-κBmRNA表達(dá)水平，從而降低了血清IL-2水平，