終末期腎病患者橈動(dòng)脈局部醛固酮-鹽皮質(zhì)激素受體系統(tǒng)活性改變及其與血管鈣化的關(guān)系.pdf

1、目的：血管鈣化所致心血管事件是終末期腎病(ESRD)患者死亡的主要原因之一，早期防治血管鈣化對(duì)改善ESRD患者預(yù)后有重要意義。醛固酮(Ald)-鹽皮質(zhì)激素受體(MR)系統(tǒng)包括醛固酮、醛固酮合成酶2(CYP11B2)、MR、11β-羥基類固醇脫氫酶2(11β-HSD2)等主要成分。研究發(fā)現(xiàn)，心血管Ald-MR系統(tǒng)活性的異常增高是心血管疾病的重要病理生理機(jī)制，MR拮抗劑可明顯降低心血管事件的發(fā)生率及死亡率。最近研究顯示，Ald可通過(guò)MR依賴

2、途徑刺激體外培養(yǎng)的血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)合成、分泌骨相關(guān)蛋白，如核心結(jié)合因子α1(Cbfα1)、骨橋蛋白(OPN)及I型膠原蛋白(Col-I)等成分，促進(jìn)VSMC向成骨細(xì)胞轉(zhuǎn)分化，形成血管鈣化。本研究目的通過(guò)對(duì)ESRD橈動(dòng)脈管壁Ald-MR系統(tǒng)活性狀態(tài)和骨化相關(guān)蛋白表達(dá)的研究，探討ESRD狀態(tài)下Ald-MR系統(tǒng)活性與血管鈣化之間關(guān)系。 方法：實(shí)驗(yàn)分為ESRD組和對(duì)照組。入選患者為2008年1～6月于我科住院的擬行透析治療或深

3、靜脈臨時(shí)置管透析1-2周的ESRD患者，共60例，男性39例，女性21例，平均年齡51.5±11.7歲，原發(fā)病為慢性腎小球腎炎、糖尿病腎病、高血壓腎病、多囊腎病等。于橈動(dòng)脈.頭靜脈端端吻合術(shù)時(shí)，留取遠(yuǎn)心端橈動(dòng)脈0.5～1.0cm，固定于10％甲醛溶液中。同時(shí)取空腹靜脈血，檢測(cè)血鈣、磷、血脂、C反應(yīng)蛋白、甲狀旁腺激素(PTH)等生化指標(biāo)。以同期因車禍行脾切除術(shù)的8例患者脾動(dòng)脈作為對(duì)照組。VanKossa銀染色法檢測(cè)兩組患者血管鈣化程度，免

4、疫組化法檢測(cè)血管11β－HSD2、MR、Cbfα1、OPN、Col-I及α-SMA表達(dá)，原位雜交法檢測(cè)血管CYP11B2mRNA表達(dá)。根據(jù)VanKossa染色結(jié)果將ESRD組患者分為無(wú)鈣化、輕-中度鈣化、重度鈣化等3個(gè)亞組，觀察3亞組患者血鈣、磷、膽固醇、甘油三酯、C反應(yīng)蛋白、PTH等生化指標(biāo)的差異，分析血管壁Ald-MR系統(tǒng)主要成分(11β-HSD2、MR蛋白與CYP11B2mRNA)表達(dá)情況，及其與骨相關(guān)蛋白(Cbfα1、OPN及C

5、ol-I)表達(dá)的關(guān)系。應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果：VanKossa染色結(jié)果顯示，ESRD組60例患者中，無(wú)鈣化、輕-中度鈣化、重度鈣化等3個(gè)亞組患者例數(shù)分別為41例、11例、8例，血管鈣化的發(fā)生率為31.67％，血管鈣化方式均為中膜鈣化，鈣化物質(zhì)沉積于中膜、內(nèi)彈力板，未見(jiàn)內(nèi)膜鈣化；對(duì)照組8例患者脾動(dòng)脈均未見(jiàn)血管鈣化。ESRD組患者血磷、PTH水平較對(duì)照組明顯增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)：相關(guān)分析

6、顯示，ESRD組患者血管鈣化程度與血磷、PTH水平明顯正相關(guān)(r值分別為0.257，0.351，P值分別為0.026，0.003)，與血鈣、鈣磷乘積、膽固醇、甘油三酯、C反應(yīng)蛋白水平無(wú)明顯相關(guān)(P>0.05)。免疫組化染色顯示，骨相關(guān)蛋白Cbfα1、OPN及Col-I在對(duì)照組患者動(dòng)脈壁僅有弱表達(dá)，但在ESRD組中均有表達(dá)，且在嚴(yán)重鈣化亞組中的表達(dá)量較無(wú)鈣化亞組(和/或輕中度鈣化亞組)明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，三種骨相關(guān)

7、蛋白分布位置與鈣化物質(zhì)沉積部位高度一致。MR、11β-HSD2在對(duì)照組弱表達(dá)，在ESRD組患者有明顯表達(dá)，其中MR主要分布于中膜平滑肌細(xì)胞核的核周，嚴(yán)重鈣化亞組MR表達(dá)明顯高于無(wú)鈣化亞組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；而11β-HSD2表達(dá)方式與MR不同，輕-中度鈣化亞組表達(dá)量略高于無(wú)鈣化亞組，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而在嚴(yán)重鈣化亞組，11β-HSD2表達(dá)較輕-中度鈣化亞組明顯下降(P<0.01)。ESRD組患者血管壁α-S

8、MA表達(dá)較對(duì)照組明顯減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，但三個(gè)亞組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。相關(guān)分析顯示，ESRD組患者血管MR與VanKossa血管鈣化評(píng)分、OPN、Cbfα1、Col-I等血管鈣化指標(biāo)明顯正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)分別為0.469(P<0.001)、0.312(P<0.05)、0.413(P<0.001)、0.379(P<0.001)。原位雜交法顯示，對(duì)照組與ESRD組患者動(dòng)脈血管壁均無(wú)CYP11B2mRNA表達(dá)

9、。 結(jié)論：(1)ESRD患者橈動(dòng)脈血管局部Ald-MR系統(tǒng)活性增強(qiáng)，表現(xiàn)為MR、11β-HSD2表達(dá)明顯增加；(2)ESRD患者橈動(dòng)脈血管MR表達(dá)上調(diào)與血管鈣化程度呈正相關(guān)，顯示Ald—MR系統(tǒng)活性增加可能是血管鈣化的重要機(jī)制之一，為ESRD患者早期使用MR拮抗劑防治心血管并發(fā)癥提供了理論依據(jù)；(3)ESRD患者橈動(dòng)脈血管壁無(wú)CYP11B2mRNA表達(dá)，且重度鈣化亞組11β-HSD2表達(dá)減弱，其原因有待進(jìn)一步研究；(4)血清磷及