BMSCs與軟骨細(xì)胞共培養(yǎng)復(fù)合BMG修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討B(tài)MSCs與同種異體肋軟骨細(xì)胞共培養(yǎng)及復(fù)合自體“雙相”骨基質(zhì)明膠(BMG)修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的可行性。
　　方法:1、貼壁離心法分離兔BMSCs，酶消化法結(jié)合組織塊法獲取肋軟骨細(xì)胞，體外擴(kuò)增，形態(tài)學(xué)觀察，繪制生長曲線、檢測BMSCs的表型，組織學(xué)鑒定軟骨細(xì)胞。2、取兩種細(xì)胞的P2代隨機(jī)分為三組:A為共培養(yǎng)組，B為高濃度單純軟骨細(xì)胞組，C為低濃度單純軟骨細(xì)胞組，體外培養(yǎng)2周后比較各組培養(yǎng)液中GAG含量的差異。3、改良的Uri

2、st法制備兔自體“雙相”BMG支架，體外與共培養(yǎng)細(xì)胞復(fù)合培養(yǎng)3天行電鏡觀察。4、制備36只實(shí)驗(yàn)兔膝關(guān)節(jié)軟骨缺損模型，隨機(jī)分為三組:實(shí)驗(yàn)組植入共培養(yǎng)細(xì)胞-BMG復(fù)合體，對照組植入單純BMG支架，空白組不作特殊處理。術(shù)后1、2、3個(gè)月取材行大體、組織學(xué)觀察并評分行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果:
　　1、貼壁離心法分離的BMSCs生長良好，酶消化法結(jié)合組織塊法獲得的肋軟骨細(xì)胞生物活性良好。
　　2、2周后A組培養(yǎng)液的GAG含量明顯

3、多于B、C組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　3、掃描電鏡示“雙相”BMG呈多孔隙網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)，細(xì)胞黏附其表面，狀態(tài)良好。
　　4、術(shù)后3個(gè)月實(shí)驗(yàn)組軟骨缺損由透明軟骨基本修復(fù)，對照組和空白組軟骨缺損由纖維組織部分修復(fù)。實(shí)驗(yàn)組在各時(shí)期的評分與對照組及空白組比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），表明其修復(fù)效果優(yōu)于其它兩組。
　　結(jié)論:BMSCs與同種異體肋軟骨細(xì)胞共培養(yǎng)，可被誘導(dǎo)分化為軟骨細(xì)胞，未出現(xiàn)明顯排斥反應(yīng)