產(chǎn)脂肪酶嗜鹽菌的鑒定、產(chǎn)酶條件及耐鹽機(jī)理的初步研究.pdf

1、嗜鹽菌是極端環(huán)境微生物的重要類(lèi)群之一，作為一類(lèi)新型的、極具應(yīng)用前景的微生物資源，具有極為特殊的生理結(jié)構(gòu)和代謝機(jī)制，同時(shí)還產(chǎn)生了許多具有特殊性質(zhì)的生物活性物質(zhì)。脂肪酶是重要的工業(yè)用酶，從極端環(huán)境中獲取具有特殊性質(zhì)的脂肪酶已成為滿(mǎn)足不同工業(yè)需求的手段之一。 本研究通過(guò)羅丹明B平板顯色法及吐溫80沉淀法從采自?xún)?nèi)蒙古錫林浩特地區(qū)鹽湖的樣品中篩選到產(chǎn)脂肪酶嗜鹽菌JNPH-3，革蘭氏染色陰性，菌體球狀。在固體培養(yǎng)基上菌落紅色，圓形，邊緣整齊

2、，表面隆起光滑，直徑0.2～0.8mm。該菌株可在含有9～30％NaCl的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，最適鹽濃度為12～27％，最適生長(zhǎng)溫度45，可在pn6.0～10.0范圍內(nèi)生長(zhǎng)，最適pn7～9.5，可耐受高濃度的Mg2+。經(jīng)形態(tài)學(xué)分析、生理生化實(shí)驗(yàn)及16SrDNA鑒定，將該菌株命名為HalorubrumaidingenseJNPH-3，屬于極端嗜鹽菌。 JNPH-3菌株所產(chǎn)脂肪酶最適反應(yīng)溫度為37℃，緩沖液pH為7.5～8.5，酶活力的表

3、現(xiàn)需要較高濃度NaCl的存在。該酶為組成型表達(dá)，即在無(wú)油脂類(lèi)誘導(dǎo)物存在下依然產(chǎn)酶，而誘導(dǎo)物的存在使菌體生長(zhǎng)受到抑制，并因此導(dǎo)致脂肪酶產(chǎn)量降低。其產(chǎn)量與菌體生長(zhǎng)相偶聯(lián)，60h達(dá)到最大，但生長(zhǎng)后期酶量降低。在已考察的各種碳氮源中，有機(jī)碳源及氮源能更好地促進(jìn)菌體生長(zhǎng)及產(chǎn)酶，菌體在糖類(lèi)源碳及無(wú)機(jī)氮源的存在下，生長(zhǎng)均較緩慢，由此導(dǎo)致產(chǎn)酶較低。 JNPH-3菌株在生長(zhǎng)過(guò)程中專(zhuān)一性依賴(lài)高濃度的Na+，對(duì)Cl-依賴(lài)性較小，用各種陰離子替代高濃度