P1GF與胃癌新生血管的相關(guān)性研究.pdf

1、背景與目的：胃癌是我國(guó)常見(jiàn)惡性腫瘤之一，其死亡率為20.93/10萬(wàn)<'[1]>，腺癌屬最常見(jiàn)的胃癌。惡性腫瘤的生長(zhǎng)、侵襲、轉(zhuǎn)移都依賴于腫瘤新生血管的生成，引起患者死亡的主要原因是腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移．血管生成對(duì)實(shí)體腫瘤的快速生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移非常重要，也是腫瘤研究的熱點(diǎn)。研究表明，在腫瘤血管生長(zhǎng)過(guò)程中，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 (Vascular endothelialgrowth factor，VEGF)起著重要的作用。胎盤生長(zhǎng)因子(placenta

2、gro—wth factor，PIGF)系VEGF家族新成員，已發(fā)現(xiàn)在一些腫瘤中有不同程度的表達(dá)<'[13～17]>，但對(duì)胃癌的研究相對(duì)缺乏資料，本試驗(yàn)通過(guò)對(duì)胃癌及癌旁組織的VEGF、PIGF的表達(dá)研究，探討VEGF、PIGF在胃癌及癌旁組織的表達(dá)水平之間的相關(guān)性，以進(jìn)一步明確胃癌預(yù)后影響因素，指導(dǎo)臨床治療提高患者生存率。 材料及方法： 1．材料 96例胃腺癌標(biāo)本來(lái)自沈陽(yáng)軍區(qū)總醫(yī)院，時(shí)間從2004年至2006年，

3、年齡從23到72歲不等，男57例，女39例，所選蠟塊重新切片，HE染色及形態(tài)學(xué)復(fù)習(xí)。 2．方法 免疫組化方法：P1GF多克隆抗體購(gòu)自美國(guó)SantaCruz公司，CD34、VEGF單克隆抗體均由上海長(zhǎng)島試劑公司提供，采用鏈霉菌抗生物素蛋白一氧化物酶連接法(Streptavidin/Peroxidase，SP)按常規(guī)步驟進(jìn)行，除一抗分別為CD34、VEGF、P1GF外，其余步驟均相同。陰性對(duì)照采用0.01MPB S液體代替一

4、抗，其他步驟不變，陽(yáng)性對(duì)照采用內(nèi)對(duì)照。 3．結(jié)果判定 3．1 腫瘤微血管密度(MVD)判斷標(biāo)準(zhǔn)：CD34標(biāo)記微血管，計(jì)算腫瘤內(nèi)著色的毛細(xì)血管和微小血管。按照Weidner[1]的評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)，凡呈現(xiàn)棕色單個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞或內(nèi)皮細(xì)胞簇均作為1個(gè)血管計(jì)，但肌層較厚及管腔面積大于8個(gè)紅細(xì)胞直徑的血管不計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)方法：在200倍視野下計(jì)數(shù)每個(gè)視野內(nèi)CD34陽(yáng)性血管數(shù)，每例隨機(jī)選擇4個(gè)不重復(fù)的視野進(jìn)行計(jì)數(shù)，求出平均值，計(jì)算每例單位視野內(nèi)平均

5、血管數(shù)，即為該例腫瘤的微血管密度(microvessel-density，MVD)值(個(gè)/x200)． 3.2 VEGF、PIGF判斷標(biāo)準(zhǔn)：VEGF與PIGF均在以細(xì)胞漿呈現(xiàn)棕黃色著色，CD34表達(dá)陽(yáng)性為血管內(nèi)皮細(xì)胞被染成黃褐色． 3.3統(tǒng)計(jì)分析：數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)應(yīng)用SPSS11.5軟件，采用x<'2>檢驗(yàn)、t檢驗(yàn)和Spearman等級(jí)相關(guān)分析。 結(jié)果：VEGF在47.92﹪(46/96)的胃癌組織表達(dá)，VEGF陽(yáng)性的胃癌組織M

6、VD為31.4±8.5/高倍視野．VEGF陰性組織中MVD為19.22±8.2/高倍視野，兩者差異有顯著性(P<0.01)PIGF 陽(yáng)性胃癌組織MVD為34.1±1.4/高倍視野，P1GF陰性胃癌組織為30.8±2.6/高倍視野，兩者差密度計(jì)數(shù)(MVD)明顯高于癌旁組織(P<0.05)，胃癌中PIGF、VEGF蛋白表達(dá)陽(yáng)性率和MVD呈明顯增高.PIGF、VEGF蛋白表達(dá)和MVD與胃癌的腫瘤分級(jí)有差異(P<0.05)。免疫組化檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)

7、，在96例胃癌中。VEGF在胃癌的表達(dá)與癌旁組織存在顯著性差異(P<0.01)。低分化型胃癌MVD值也明顯高于中、高分化型胃癌(P<0.05)，而后兩者M(jìn)VD值之間差異無(wú)顯著性(P>0.05)。相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，在胃癌中，VEGF表達(dá)與MVD值呈明顯正相關(guān)(r=0.541，P<0.01)，PIGF表達(dá)與MVD值亦呈明顯正相關(guān)(r=0.392，P<0.01)，。 結(jié)論： 1.vEGF在三型胃癌組織與癌旁組織中均有不同程度的表達(dá)