ERCC1、P27kip1、CyclinE在胃癌中的表達(dá)及其與胃癌預(yù)后相關(guān)性研究.pdf

1、背景與目的
　　 胃癌是最常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤，全世界每年胃癌發(fā)病率約為13.86/10萬(wàn)人，死亡率位居惡性腫瘤的第二位。胃癌是一種全身性疾病，單純手術(shù)治療尚不能取得令人滿意的臨床效果，必須采取以手術(shù)為主，放化療結(jié)合的綜合治療才能進(jìn)一步提高患者的生存率。傳統(tǒng)的化療藥物主要有抗代謝類藥物、烷化劑類、抗生素類、鉑類和植物類等5大類藥物。隨著當(dāng)代分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)的發(fā)展，出現(xiàn)了治療癌癥的分子靶向藥物(targeted medici

2、ne)。靶向藥物通過(guò)作用于靶點(diǎn)發(fā)揮抗腫瘤作用，有相應(yīng)的優(yōu)勢(shì)人群。近兩年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，如同小分子靶向藥物治療存在優(yōu)勢(shì)人群一樣，化療藥物也有優(yōu)勢(shì)人群，如何篩選優(yōu)勢(shì)人群，使接受化療的患者獲益最大，避免過(guò)度治療，是我們目前面臨的主要問(wèn)題。核苷酸切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1(ERCC1)通過(guò)核苷酸切除修復(fù)通路實(shí)現(xiàn)對(duì)DNA的損傷修復(fù)，該通路也是鉑-DNA絡(luò)合物損傷修復(fù)的重要途徑。如果DNA損傷不能得到及時(shí)修復(fù)，將導(dǎo)致細(xì)胞異常增殖，引起腫瘤的發(fā)生。同時(shí)該基因

3、在腫瘤細(xì)胞對(duì)順鉑的耐藥機(jī)制中發(fā)揮重要的作用。已有研究報(bào)道：在肺癌術(shù)后接受以順鉑為基礎(chǔ)的化療患者中，ERCC1過(guò)表達(dá)者預(yù)后差。細(xì)胞周期在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著至關(guān)重要的作用。大多數(shù)分子的改變均涉及到基因?qū)?xì)胞周期的調(diào)控，其中細(xì)胞周期依賴性激酶(CDKs)、細(xì)胞周期依賴性激酶抑制因子(CDKIs)及細(xì)胞周期素(Cyclin A、D、E)是細(xì)胞周期重要的調(diào)控因子。在細(xì)胞周期G1/S調(diào)控中最重要的是細(xì)胞周期依賴性激酶2(CDK2)，CyclinE

4、與CDK2形成復(fù)合物在G1/S中起促進(jìn)作用，而P27Kipl主要通過(guò)與CDK2結(jié)合，實(shí)現(xiàn)對(duì)其活性的抑制，在細(xì)胞周期的G1/S調(diào)控中起抑制作用。這樣P27Kipl與CyclinE圍繞CDK2就形成了一種作用相反的關(guān)系，共同完成對(duì)細(xì)胞周期的G1/S調(diào)控，使細(xì)胞增殖正確、有序地進(jìn)行。有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)P27kip1低表達(dá)與CyclinE高表達(dá)和食管癌進(jìn)展及預(yù)后有密切關(guān)系。目前關(guān)于ERCC1、P27kip1、CyclinE與胃癌關(guān)系的研究鮮見(jiàn)，且有

5、關(guān)其對(duì)胃癌預(yù)后影響結(jié)果也不一致。本研究選擇了ERCC1、P27kip1和CyclinE三個(gè)指標(biāo)旨在探討它們與胃癌發(fā)生、發(fā)展及其與患者生存期的關(guān)系，為臨床預(yù)測(cè)療效和評(píng)估預(yù)后提供理論基礎(chǔ)。
　　 材料與方法
　　 1.收集臨床病理資料完整且有隨訪結(jié)果的45例胃癌患者作為實(shí)驗(yàn)組，10例正常胃組織作為對(duì)照組。
　　 2.應(yīng)用免疫組化方法(EliVisionTM二步法)檢測(cè)45例胃癌組織與10例正常胃組織中ERCC1、P2

6、7Kip1、CyclinE蛋白的表達(dá)情況。
　　 3.45例胃癌患者術(shù)后均接受以鉑類和氟尿嘧啶為基礎(chǔ)的化療，方案為順鉑25mg/㎡，靜滴，第1～3天；亞葉酸鈣0.1，靜滴，第1～5天；氟尿嘧啶500mg/㎡，靜滴，第1～5天，每3周重復(fù)，中位周期數(shù)為5個(gè)周期。手術(shù)后每2～3個(gè)月行胸腹部螺旋CT檢查一次，至腫瘤復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移，所有復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移病例均經(jīng)影像學(xué)、胃鏡活檢證實(shí)。術(shù)前均未接受放療和化療，所有標(biāo)本經(jīng)常規(guī)福爾馬林固定，石蠟包埋。

7、r>　　 4.應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS11.0分析ERCC1、P27Kip1、CyclinE蛋白的表達(dá)與患者各個(gè)臨床病理參數(shù)及生存期之間的關(guān)系。
　　 結(jié)果：
　　 1.實(shí)驗(yàn)組45例胃癌組織中ERCC1、P27Kip1、CyclinE蛋白陽(yáng)性率分別為31.1％(14/45)、35.6％(16/45)、55.6％(25/45)，10例正常胃組織陽(yáng)性率分別為70％(7/10)、80％(8/10)、20％(2/10)，兩組之間

8、表達(dá)有顯著性差異(P<0.05)。
　　 2.ERCC1、P27Kip1、CyclinE蛋白表達(dá)與患者的性別、年齡、腫瘤大小、部位、分化程度均無(wú)顯著性差異(P>0.05)；而與腫瘤的浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及臨床分期差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　 3.胃癌中P27Kip1與CyclinE蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，相關(guān)系數(shù)r=-0.47。
　　 4.ERCC1、P27Kip1陽(yáng)性患者中位無(wú)疾

9、病生存時(shí)間(DFS)分別為6.8和12個(gè)月，顯著低于陰性患者的中位DFS分別為24和18個(gè)月，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；CyclinE表達(dá)陽(yáng)性與陰性患者無(wú)疾病生存期分別為13和15個(gè)月，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。
　　 5.ERCC1、P27Kipl均陽(yáng)性7例(15％)，均陰性22例(48％)，ERCC1(+)、P27Kip1(-)7例(15％)，ERCC1(-)、P27Kip1(+)9例(20％)，這四組無(wú)疾病生存

10、期(DFS)分別為6.8、28.1、11.2、24.6個(gè)月，其中ERCC1、P27Kipl均陰性與均陽(yáng)性、ERCC1(+)、P27Kip1(-)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與ERCC1(-)、P27Kip1(+)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.ERCC1、P27Kip1的低表達(dá)和CyclinE高表達(dá)可能與胃癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)。
　　 2.ERCC1、P27Kip1、CyclinE

11、蛋白表達(dá)均與患者的性別、年齡、腫瘤大小、部位、分化程度無(wú)相關(guān)性；與腫瘤的浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、臨床分期有相關(guān)性。
　　 3.P27Kip1與CyclinE蛋白在胃癌的發(fā)生、發(fā)展中呈負(fù)相關(guān)。
　　 4.胃癌患者術(shù)后接受以鉑類和氟尿嘧啶為基礎(chǔ)的輔助化療，ERCC1、P27 Kip1、CyclinE蛋白表達(dá)陽(yáng)性的中位生存時(shí)間短于表達(dá)陰性者，提示ERCC1、P27Kipl、CyclinE蛋白高表達(dá)的胃癌患者生存期短，預(yù)