食管鱗狀細胞癌中基因的異常表達及其臨床意義的研究.pdf

1、目的：研究人食管鱗狀細胞癌與癌旁正常組織的基因表達譜，通過對比基因表達的差異，尋找與人食管鱗癌發(fā)生、發(fā)展相關的基因。
　　方法：1.應用基因芯片技術檢測食管鱗癌中的差異表達基因。提取人食管鱗癌組織與癌旁正常組織的mRNA，逆轉錄成cDNA，并用Cy3-dUTP標記正常食管組織，用Cy5-dUTP標記食管鱗癌組織，制成探針，與基因芯片進行雜交，經掃描儀掃描后，對獲取的信號數據進行軟件分析、對比，篩選出差異表達的基因；
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2、應用免疫組織化學方法對差異表達的NFκB和CyclinD1以及相關的C-Src和 EGFR進行蛋白表達的檢測，探討其與食管鱗癌發(fā)生發(fā)展及生物學行為的關系。
　　結果：1.應用基因芯片技術檢測4例食管鱗狀細胞癌及癌旁正常組織的新鮮標本，發(fā)現4329條基因發(fā)生差異表達，其中2293條上調，2036條下調，根據GO（gene ontology）分類，將這些基因按GO分子功能（function term）分為37類，其中與細胞分化、成熟，

3、分子定位、連接，信號傳導，酶活性調節(jié)，以及基因轉錄、翻譯調節(jié)有關的基因最多；2.表達上調的NFκB具有5種分子功能，參與多種生物學過程，在細胞的惡性轉化過程中起重要作用。3.在差異表達的基因中有許多基因與NFκB有相同的功能。4.用免疫組織化學方法檢測表達上調的NFκB和CyclinD1以及C-Src和EGFR的蛋白表達情況。在100例食管鱗癌組織及30例正常對照食管組織中，NFκB在正常上皮無表達(0％，0/30)，在癌組織中表達顯著

4、增強（61%，61/100），兩者相比有統計學意義（p>0.05），但表達強度與食管癌的分化程度、浸潤深度無關（p>0.05），而與淋巴結轉移相關(p<0.05)；CyclinD1在正常鱗狀上皮中有表達（33.33%，10/30），在癌組織中表達增強（57%，57/100），兩者相比有統計學意義（p<0.05），在癌組織中表達強度與組織學分級及淋巴結轉移有關(p<0.05),與浸潤深度無關（p>0.05）；C-Src在正常上皮中有表達（

5、20%，6/30），在癌組織中表達增強（59%，59/100），兩者相比有統計學意義（p<0.05），在癌組織中表達強度與分化程度、浸潤深度、淋巴結轉移均相關（p<0.05）；EGFR在正常上皮中有表達（30%，9/30）,在癌組織中表達增強(67%，67/100)，兩者相比有統計學意義（p<0.05），在癌組織中表達強度與分化程度及浸潤深度、淋巴結轉移均相關（p<0.05）。5.在食管鱗癌中，NFκB和CyclinD1、C-Src、E

6、GFR蛋白表達具有相關性（p<0.05）。
　　結論：1.食管鱗癌的發(fā)生發(fā)展與多基因的異常表達有關。2.應用基因芯片技術可以對食管鱗癌的基因表達譜進行分析，以篩選食管鱗癌相關基因。3. NFκB在食管鱗狀細胞癌中表達增強，但與食管鱗癌的分化程度、浸潤深度無關，而與淋巴結轉移相關，提示NFκB可能參與食管鱗癌的發(fā)生和淋巴結轉移。4.CyclinD1在癌組織中表達增強，且表達強度與分化程度、淋巴結轉移相關；EGFR，C-Src在癌組織