Livin和Bcl-2蛋白在食管鱗狀細胞癌中的表達及其臨床意義.pdf

1、目的：細胞凋亡是體內(nèi)清除衰老、退化和受損細胞的一個重要途徑，細胞凋亡與增殖的動態(tài)平衡在維持多細胞動物的生長發(fā)育和正常組織器官的結(jié)構(gòu)與功能中起著重要作用。一旦凋亡過程受到抑制，使基因發(fā)生突變的細胞得以生存和增殖，最終會導致腫瘤的發(fā)生。細胞凋亡與癌變的關(guān)系引起人們的廣泛關(guān)注，成為目前分子細胞生物學的一個新的研究熱點。Livin（ML-IAP/KIAP）是IAP（inhibitor of apoptosis protein）家族的新成員，是重

2、要的細胞凋亡調(diào)節(jié)因子，其組織分布具有明顯的細胞選擇性，特異性表達于人的胚胎組織以及大多數(shù)人類實體瘤細胞。隨著研究的深入，Livin在IAP家族中抑制細胞凋亡、誘導細胞增殖的作用愈來愈發(fā)引起人們的關(guān)注和重視。Bcl-2（B-cell lymphoma/leukemia-2）基因是從濾泡性淋巴瘤細胞中分離出來的一種癌基因，為細胞凋亡或程序性死亡過程的拮抗基因。 Bcl-2在多種正常組織如：骨髓、表皮、淋巴組織及各種腺體廣泛表達。在多種人體腫

3、瘤中也檢測到Bcl-2表達，并與腫瘤的分化、抗藥性、預后等有關(guān)。本研究旨在通過采用流式細胞技術(shù)檢測Livin和Bcl-2在食管鱗狀細胞癌中的表達情況，來探討Livin與Bcl-2在食管鱗狀細胞癌發(fā)展過程中的表達規(guī)律及其相關(guān)性，為食管癌的臨床治療研究提供科學的理論依據(jù)。
　　 方法：采用流式細胞分析技術(shù)對食管鱗狀細胞癌患者的癌組織進行Livin和Bcl-2的計量分析。腫瘤組織及遠癌組織標本取自河北醫(yī)大第四醫(yī)院胸外科2008年5月～

4、2008年8月行根治手術(shù)的食管鱗狀細胞癌患者標本50例，其中男性32例，女性18例，年齡43～72歲，根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟（UICC）食管鱗狀細胞癌國際TNM分期標準：T18例，T210例，T332例，N027例，N123例。以同期50例食管遠癌組織作為對照。用組織剪取新鮮標本約0.5cm×0.5cm×0.5cm大小的組織塊1-2塊，用75％酒精固定，依次進行過濾、離心、標抗等步驟，最后用流式細胞儀對標抗好的單細胞懸液組織進行流式分析，以P

5、BS液作為陰性對照，只加二抗（FITC）作為陽性對照，檢測結(jié)果以平均熒光強度（x±S）表示。用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對檢測結(jié)果進行統(tǒng)計分析，包括t檢驗、方差分析、Pearson相關(guān)分析等。
　　 結(jié)果：
　　 1.Livin在不同組織中的表達情況：Livin在食管鱗狀細胞癌組織中的平均熒光強度為197.87±50.13，在癌旁組織中的平均熒光強度為78.56±39.81，兩組相比較，有統(tǒng)計學差異性（P<0.05）。

6、r>　　 2.Bcl-2在不同組織中的表達情況：Bcl-2在食管鱗狀細胞癌組織中的平均熒光強度為322.93±54.77，在癌旁組織中的平均熒光強度為164.49±47.46，在癌組織和癌旁組織之間存在顯著的統(tǒng)計學差異性（P<0.05）。
　　 3.Livin和Bcl-2在食管鱗狀細胞癌組織中的表達與臨床病理特征的關(guān)系：食管鱗狀細胞癌患者的年齡、性別、腫瘤的組織分型與Livin及Bcl-2表達無關(guān)；Livin及 Bcl-2在食

7、管鱗狀細胞癌組織中的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及癌組織浸潤深度之間有統(tǒng)計學差異（P<0.05）。
　　 4.Livin和Bcl-2與食管鱗狀細胞癌國際 TNM分期（UICC）的關(guān)系：食管鱗狀細胞癌中Livin在Ⅰ期的平均熒光強度為108.93±18.07，在Ⅱa期的平均熒光強度為160.96±36.70，在Ⅱ b期的平均熒光強度為194.31±32.03，在Ⅲ期的平均熒光強度為241.91±22.58，各期之間存在顯著的統(tǒng)計學差異性（P<

8、0.05）；Bcl-2在Ⅰ期的平均熒光強度為227.13±21.34，在Ⅱa期的平均熒光強度為271.97±23.93，在Ⅱ b期的平均熒光強度為322.63±36.25，在Ⅲ期的平均熒光強度為369.37±23.37，各期之間存在顯著的統(tǒng)計學差異性（P<0.05）。
　　 5.Livin和Bcl-2之間的相互關(guān)系：癌組織中，Livin的平均熒光強度表達為197.87±50.13，Bcl-2的平均熒光強度表達為322.93±54

9、.77，相關(guān)檢驗其相關(guān)系數(shù)r=0.856，P<0.01；癌旁組織中，Livin的平均熒光強度表達為78.56±39.81，Bcl-2的平均熒光強度表達為164.49±47.46，相關(guān)檢驗其相關(guān)系數(shù)r=0.081，P>0.05。
　　 結(jié)論：
　　 1. Livin和Bcl-2在食管鱗狀細胞癌組織中的含量表達明顯高于它們在食管癌旁組織中的含量表達。
　　 2. Livin.及Bcl-2在食管鱗狀細胞癌組織中的表達與

10、患者的年齡、性別、腫瘤的分化程度無關(guān)。Livin蛋白及Bcl-2蛋白在食管鱗狀細胞癌組織中的表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及癌組織浸潤深度有關(guān)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的癌組織與浸潤程度較深的癌組織Livin蛋白與Bcl-2蛋白的表達較高。
　　 3. Livin及Bcl-2在食管鱗狀細胞癌組織中的表達與食管鱗狀細胞癌TNM分期有關(guān)，隨著分期的增加Livin及Bcl-2的表達逐漸增高。
　　 4.在食管鱗狀細胞癌組織中，Livin和Bcl-2兩種