芹菜素對人結(jié)腸癌HCT-8細(xì)胞生長抑制和誘導(dǎo)凋亡作用研究.pdf

1、近年來，結(jié)腸癌的發(fā)病率呈逐年升高趨勢，是我國常見惡性腫瘤之一，嚴(yán)重危害人類健康。臨床對結(jié)腸癌的治療仍以手術(shù)、化療及其他輔助治療為主。術(shù)后化療毒副作用較多，對人體帶來一定的損傷。芹菜素（apigenin，API）是一種黃酮類化合物，大量存在于水果、蔬菜、豆類、茶葉中。研究發(fā)現(xiàn)芹菜素具有抗癌、降壓、降血脂、擴(kuò)血管、抗炎等作用。關(guān)于芹菜素抗消化道腫瘤的研究，特別是對結(jié)腸癌的研究少見報(bào)道，其殺傷結(jié)腸癌等癌細(xì)胞的作用機(jī)制尚未明確。本研究主要以人結(jié)

2、腸癌HCT-8細(xì)胞為研究對象，觀察芹菜素對HCT-8細(xì)胞的生長抑制和誘導(dǎo)凋亡的作用，并對芹菜素殺傷人結(jié)腸癌HCT-8細(xì)胞的作用機(jī)制進(jìn)行初步探討。
　　為初步觀察芹菜素對結(jié)腸癌細(xì)胞有無生長抑制作用，本實(shí)驗(yàn)首先采用MTT法觀察芹菜素對結(jié)腸癌細(xì)胞生長和增殖的影響，實(shí)驗(yàn)分陰性對照組、5μg·ml-1芹菜素組、10μg·ml-1芹菜素組、15μg·ml-1芹菜素組、20μg·ml-1芹菜素組，分別作用24h、48h、72h；采用了DNA凝膠

3、電泳觀察不同濃度（5μg·ml-1芹菜素組、10μg·ml-1芹菜素組、15μg·ml-1芹菜素組、20μg·ml-1芹菜素組和陰性對照組）對HCT-8的細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡情況；還采用流式細(xì)胞術(shù)檢測不同濃度芹菜素（10μg·ml-1芹菜素組、20μg·ml-1芹菜素組）誘導(dǎo)HCT-8的細(xì)胞早期凋亡情況。同時對不同濃度芹菜素（5μg·ml-1、10μg·ml-1、15μg·ml-1、20μg·ml-1）做用于HCT-8的細(xì)胞后Caspase-

4、3、Caspase-6酶活性進(jìn)行了檢測。
　　實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，隨著芹菜素濃度（5μg·ml-1、10μg·ml-1、15μg·ml-1、20μg·ml-1）的增加，細(xì)胞凋亡率逐漸增高且呈一定的量效關(guān)系；5μg·ml-1芹菜素組、10μg·ml-1芹菜素組、15μg·ml-1芹菜素組、20μg·ml-1芹菜素組作用于HCT-8細(xì)胞48小時檢測到DNA Ladder，用藥組梯狀條帶的亮度明顯亮于對照組，且與藥物劑量正相關(guān)；流式細(xì)胞術(shù)檢測10

5、μg·ml-1芹菜素組、20μg·ml-1芹菜素組，作用24小時細(xì)胞凋亡率分別為(19.16±0.14)％及（26.67±0.13)%；Caspase-3、Caspase-6酶活性顯著增強(qiáng)。
　　綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)芹菜素對人結(jié)腸癌HCT-8細(xì)胞有抑制其生長、誘導(dǎo)其凋亡的作用。Caspase-3及 Caspase-6酶活性有顯著增加，芹菜素的誘導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡作用可能是通過此途徑來完成的。但芹菜素抑制人結(jié)腸癌HCT-8細(xì)胞增殖是否