芹菜素增強(qiáng)阿糖胞苷誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞生長抑制和凋亡作用研究.pdf

1、研究背景:芹菜素（4’,5，7－三羥基黃酮,API）具有多種生物學(xué)活性，研究證明，芹菜素具有抗腫瘤作用。Bcl-2與急性髓性白血病 (AML)藥物治療中的多藥耐藥(MDR)密切相關(guān)。本研究旨在觀察API和阿糖胞苷(Ara-C)及兩者合用對(duì)人急性髓性白血病(HL-60)細(xì)胞生長和凋亡以及NF-κB和Bcl-2蛋白表達(dá)的影響。 方法:體外培養(yǎng)HL-60細(xì)胞，MTT法測定細(xì)胞增殖活性；細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測細(xì)胞存活率；PI染色FCM測定細(xì)胞的

2、凋亡率；DNA瓊脂糖凝膠電泳法觀察細(xì)胞基因DNA梯形條帶；FITC標(biāo)記間接免疫熒光FCM分析細(xì)胞NF-κB和Bcl-2蛋白表達(dá)。 結(jié)果:MTT法測定證實(shí)API和Ara-C均能降低HL-60細(xì)胞增殖活性，呈濃度依賴性，其IC50值分別為55.67μM和52.83μM。API(12.5μM,25.0μM)分別與Ara-C合用具有協(xié)同作用(CI值分別是0.340和0.372)。細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果顯示：API和Ara-C均以時(shí)間和劑量的依賴方

3、式降低HL-60細(xì)胞存活率。PI染色FCM測定結(jié)果表明，API和Ara-C顯著誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞凋亡，且API(12.5μM,25.0μM)分別與Ara-C合用具有協(xié)同誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用(q值分別為1.796和2.350)。API(12.5μM)分別與Ara-C(12.5μM,25.0μM)合用作用24小時(shí)DNA瓊脂糖凝膠電泳呈現(xiàn)典型DNA梯形條帶。FITC標(biāo)記間接免疫熒光FCM分析發(fā)現(xiàn)Ara-C刺激HL-60細(xì)胞NF –κB和 Bcl

4、- 2蛋白的表達(dá)，可能與HL-60細(xì)胞對(duì)其產(chǎn)生凋亡抗性有關(guān)；而API能抑制HL-60細(xì)胞NF –κB和 Bcl - 2蛋白的基礎(chǔ)表達(dá)和Ara-C刺激的表達(dá)增加。 結(jié)論: 1)API具有誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞生長抑制和凋亡作用； 2)API具有增強(qiáng)Ara-C誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞生長抑制和凋亡作用； 3)API對(duì)Ara-C抑制HL-60細(xì)胞生長和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡作用的協(xié)同效應(yīng)可能與其能下調(diào)HL-60細(xì)胞NF –κB和