芹菜素增強阿糖胞苷誘導HL-60細胞生長抑制和凋亡作用研究.pdf

1、研究背景:芹菜素（4’,5，7－三羥基黃酮,API）具有多種生物學活性，研究證明，芹菜素具有抗腫瘤作用。Bcl-2與急性髓性白血病 (AML)藥物治療中的多藥耐藥(MDR)密切相關。本研究旨在觀察API和阿糖胞苷(Ara-C)及兩者合用對人急性髓性白血病(HL-60)細胞生長和凋亡以及NF-κB和Bcl-2蛋白表達的影響。 方法:體外培養(yǎng)HL-60細胞，MTT法測定細胞增殖活性；細胞計數(shù)法檢測細胞存活率；PI染色FCM測定細胞的

2、凋亡率；DNA瓊脂糖凝膠電泳法觀察細胞基因DNA梯形條帶；FITC標記間接免疫熒光FCM分析細胞NF-κB和Bcl-2蛋白表達。 結果:MTT法測定證實API和Ara-C均能降低HL-60細胞增殖活性，呈濃度依賴性，其IC50值分別為55.67μM和52.83μM。API(12.5μM,25.0μM)分別與Ara-C合用具有協(xié)同作用(CI值分別是0.340和0.372)。細胞計數(shù)結果顯示：API和Ara-C均以時間和劑量的依賴方

3、式降低HL-60細胞存活率。PI染色FCM測定結果表明，API和Ara-C顯著誘導HL-60細胞凋亡，且API(12.5μM,25.0μM)分別與Ara-C合用具有協(xié)同誘導細胞凋亡作用(q值分別為1.796和2.350)。API(12.5μM)分別與Ara-C(12.5μM,25.0μM)合用作用24小時DNA瓊脂糖凝膠電泳呈現(xiàn)典型DNA梯形條帶。FITC標記間接免疫熒光FCM分析發(fā)現(xiàn)Ara-C刺激HL-60細胞NF –κB和 Bcl

4、- 2蛋白的表達，可能與HL-60細胞對其產(chǎn)生凋亡抗性有關；而API能抑制HL-60細胞NF –κB和 Bcl - 2蛋白的基礎表達和Ara-C刺激的表達增加。 結論: 1)API具有誘導HL-60細胞生長抑制和凋亡作用； 2)API具有增強Ara-C誘導HL-60細胞生長抑制和凋亡作用； 3)API對Ara-C抑制HL-60細胞生長和誘導細胞凋亡作用的協(xié)同效應可能與其能下調HL-60細胞NF –κB和