炔類黃酮對(duì)白血病HL-60細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用及其分子機(jī)理研究.pdf

1、目的： 研究炔類黃酮對(duì)白血病HL-60細(xì)胞增殖和細(xì)胞凋亡的影響，探討炔類黃酮誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制。 方法： 在體外設(shè)定的不同濃度梯度和作用時(shí)間，以炔類黃酮分別作用于白血病HL-60細(xì)胞，倒置相差顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；MTT法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率；瓊脂糖凝膠電泳(DNA ladder)檢測(cè)染色體DNA斷裂情況；流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞周期變化以及細(xì)胞表面FAS和FASL的表達(dá)；RT-PCR、We

2、stern分別檢測(cè)bc1-2，bax，apaf-1，caspase3，caspase8，caspase9基因在mRNA和蛋白水平的表達(dá)變化。 結(jié)果： 炔類黃酮作用于白血病HL-60細(xì)胞后，細(xì)胞出現(xiàn)皺縮、粘附性降低、染色體凝集和邊集現(xiàn)象；細(xì)胞生長(zhǎng)受到明顯抑制；DNA Ladder可見明顯梯形條帶；流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)120μg/ml的炔類黃酮作用72h的細(xì)胞凋亡率為29.74％，細(xì)胞發(fā)生G0～G1期阻滯。RT-PCR、W