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文檔簡介
1、目的:
對正常大鼠予番瀉葉灌胃加束縛應(yīng)激,觀察大鼠一般情況、體質(zhì)量增長率、稀便率、糞便隱血分析以及結(jié)腸病理等的變化,評價大鼠D-IBS模型,探討簡單、可靠、周期短、可重復(fù)性強的D-IBS模型構(gòu)建方法。
通過觀察腹瀉型腸易激綜合征(D-IBS)大鼠血清及結(jié)腸黏膜血管活性腸肽(VIP)的變化,探討附子理中湯治療D-IBS模型大鼠的可能機制,進一步闡明附子理中湯治療D-IBS的具體作用靶點,為該方的臨床合理應(yīng)用提供實驗基礎(chǔ)
2、,為中藥方劑治療功能性腸病提供思路及方法,為挖掘出新的治療功能性腸病的有效藥物提供實驗依據(jù)。
方法:
1、將50只SPF級成年SD大鼠隨機分為對照組(C)和模型組(M),對照組10只,模型組40只,每組雌雄各半。適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后,秤起每只大鼠體質(zhì)量作為初始體質(zhì)量,模型組予濃度為0.2kg/L的番瀉葉水煎液灌胃,灌胃結(jié)束后1h用統(tǒng)一拉力橡皮筋對大鼠進行束縛2h,將其四肢固定在木板上,使其活動受限,煩躁不安;對照組每天只
3、予生理鹽水灌胃,不行束縛。每隔1天同一時間秤取大鼠體質(zhì)量作為當(dāng)日體質(zhì)量,觀察大鼠每天排便情況,連續(xù)2周,通過觀察大鼠一般情況,評估大鼠體質(zhì)量增長率及稀便率,對大鼠糞便進行分析,并從每組中隨機抽取2只大鼠做結(jié)腸粘膜病理切片,評價造模成功與否。
2、將造模成功的D-IBS大鼠隨機分成4組,分別為模型組(M),得舒特組(D),附子理中湯小劑量組(f)、附子理中湯大劑量組(F),每組8只,雌雄各半;另外,將對照組剩余8只大鼠設(shè)為正常組
4、(Z)納入第二部分實驗,共5組大鼠,各組加相應(yīng)的藥物干預(yù);Z組每天只予等量生理鹽水灌胃,M組每天灌服0.2kg/L的番瀉葉水煎液后1h予等量生理鹽水灌胃,D組每天灌服0.2kg/L的番瀉葉水煎液后1h予1.5mg/mL的得舒特溶液灌胃,f組每天灌服0.2kg/L的番瀉葉水煎液后1h予0.75g/mL的附子理中湯灌胃,F組每天灌服0.2kg/L的番瀉葉水煎液后1h予1.5g/mL的附子理中湯灌胃,連續(xù)2周。
3、末次給藥后,禁食
5、不禁水24h,10%水合氯醛腹腔麻醉后剖開大鼠腹部,腹主動脈采血至大鼠心跳停止,離心血清保存,取距肛8cm結(jié)腸,沿縱軸剪開,刮取結(jié)腸黏膜組織,用勻漿機制成勻漿,-20℃冷藏。
4、采用放射免疫分析法(RIA)測定各組大鼠血清及結(jié)腸粘膜血管活性肽(VIP)含量。
結(jié)果:
1、經(jīng)番瀉葉水煎液灌胃加束縛應(yīng)激的模型組大鼠體質(zhì)量增長緩慢,部分呈負(fù)增長,對比對照組有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05);
2、造模第2天
6、開始,模型組大鼠出現(xiàn)不同程度的稀便,部分可見排粘液便,無見排膿血便,糞便OB在(+)以內(nèi),造模第14天稀便率達50%以上,對照組全程未出現(xiàn)稀便,對比對照組,模型組稀便率有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)。
3、各組D-IBS模型大鼠經(jīng)藥物治療后第3天,食欲逐漸增強,體質(zhì)量逐漸增長,稀便明細(xì)減少,腹瀉癥狀緩解,對比模型組,腹瀉指數(shù)有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01);
4、模型組大鼠血清及結(jié)腸粘膜VIP含量均較正常組高(p<0.05
7、);各藥物干預(yù)組血清及結(jié)腸粘膜VIP含量均較模型組低(p<0.05);附子理中湯大、小劑量組間血清及結(jié)腸粘膜VIP含量無明顯差異。
結(jié)論:
1、以0.2kg/L的番瀉葉水煎液灌胃聯(lián)合橡皮筋束縛應(yīng)激能成功構(gòu)建大鼠D-IBS模型;
2、附子理中湯能減輕D-IBS腹瀉癥狀,增加D-IBS大鼠的食欲,提高體質(zhì)量增長率;
3、附子理中湯通過抑制D-IBS大鼠血清及結(jié)腸粘膜VIP的表達,使過度表達的VIP逐漸
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