干細(xì)胞因子與c-kit在自體移植皮片色素沉著中的作用.pdf

1、背景： 自體皮片移植是整形外科常用的手術(shù)方法,尤其對于修復(fù)大面積皮膚缺損,仍為首選方法；但皮片存活后常伴有不同程度的色素沉著,即使在隱蔽植皮部位仍可以出現(xiàn)明顯色素沉著;且皮片越薄,色素沉著越明顯。皮片移植后色素沉著嚴(yán)重地影響了患者術(shù)后形態(tài)效果,并限制了皮片移植術(shù)的廣泛應(yīng)用。由于對皮片移植后色素沉著機(jī)制不甚明了,臨床上缺乏有效的防治措施。探索皮片移植后色素沉著的發(fā)生機(jī)制,已經(jīng)成為整形外科急需解決的問題。 目前研究已經(jīng)證實(shí)：

2、皮片移植后,黑素細(xì)胞合成功能及增殖功能增強(qiáng)是引起皮片內(nèi)黑素顆粒增多,產(chǎn)生色素沉著的關(guān)鍵。酪氨酸酶是黑素合成的關(guān)鍵酶,黑素合成主要受黑素細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶基因家族蛋白:TRY、TRP-1、TRP-2的調(diào)控。 SCF是近年來被發(fā)現(xiàn)的具有促進(jìn)黑素細(xì)胞增殖與黑素顆粒合成雙重作用的細(xì)胞因子。SCF與它的跨膜受體c-kit的結(jié)合點(diǎn)為酪氨酸激酶活性部位,兩者結(jié)合能夠促進(jìn)TYR、TRP-1、TRP-2的轉(zhuǎn)錄、表達(dá)或修飾。 此外,皮片移植過程

3、中經(jīng)歷皮片缺血、代謝產(chǎn)物蓄積、炎性介質(zhì)釋放、血管重建等始動因素,在這些因素作用下激活一系列信號蛋白(如ET-1、IL-1、MIFT等),這些信號分子已經(jīng)部分被證實(shí)為SCF/c-kit的上游或下游信號蛋白,通過調(diào)節(jié)酪氨酸酶活性進(jìn)一步調(diào)控黑素細(xì)胞功能,導(dǎo)致皮片內(nèi)黑色素增多,并導(dǎo)致色素沉著。 目前研究已經(jīng)證實(shí)SCF/c-kit在許多色素相關(guān)性疾病中起重要的調(diào)控作用。但對SCF/c-kit通路調(diào)控皮片移植后色素沉著方面的研究甚少,國內(nèi)外

4、尚無報(bào)道。SCF/c-kit是否參與皮片移植色素沉著發(fā)生機(jī)制中,并起重要調(diào)控作用有待我們進(jìn)一步研究。 目的： 對SCF/c-kit在自體移植中厚皮片、正常皮膚的表達(dá)與轉(zhuǎn)錄進(jìn)行研究,為自體移植皮片過度色素沉著的機(jī)理的研究奠定一定的理論基礎(chǔ)。 內(nèi)容與方法： 1.收集標(biāo)本：分3組①實(shí)驗(yàn)組：面頸部自體中厚皮片移植術(shù)后1年左右,局部需再次手術(shù)患者的色素沉著皮膚標(biāo)本；②對照組1：每例實(shí)驗(yàn)組標(biāo)本周圍正常皮膚；③對照組2

5、：供區(qū)周圍正常皮膚。 2.采用sABC與Envision免疫組化方法,結(jié)合MIQAS定量分析方法,對SCF與c-kit蛋白在移植皮片及正常皮膚中的表達(dá)進(jìn)行定性、定位、定量分析。 3.采用熒光染料real-timePCR方法,對SCF與c-kit mRNA在皮片及正常皮膚中轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行定量分析。 結(jié)果： 1.IHC部分:SCF與c-kit表達(dá)主要定位于表皮基底層黑素細(xì)胞、角朊細(xì)胞胞漿或細(xì)胞膜表面。SCF與c

6、-kit在大部分自體中厚移植皮片中呈強(qiáng)陽性表達(dá)。SCF與c-kit在實(shí)驗(yàn)組與對照組的表達(dá)差異均有顯著性意義(P＜0.01);在受區(qū)周圍正常皮膚與原供區(qū)周圍正常皮膚中SCF的表達(dá)無差異無顯著性(P＞0.05)。 2.熒光實(shí)時定量PCR部分:SCF與c-kitmRNA在實(shí)驗(yàn)組與對照組中均有表達(dá),SCF與c-kitmRNA在自體移植中厚皮片中的表達(dá)較正常皮膚對照中明顯增高,且差異具有顯著性(P＜0.01)。 結(jié)論： S