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1、胎兒作為半同種移植物不被母體免疫系統(tǒng)所排斥,有賴于母一胎免疫耐受的建立和維持。這種免疫調(diào)節(jié)作用不僅發(fā)生在母體外周;同時(shí)也發(fā)生于母一胎界面局部;母一胎界面更直接地影響著母一胎免疫調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)的中心環(huán)節(jié)。如果母一胎界面局部不能建立良好的免疫耐受,則可能導(dǎo)致妊娠失敗,從而發(fā)生自然流產(chǎn)。 APC表面表達(dá)的協(xié)同刺激分子CD80/CD86和T細(xì)胞表面的CD28/CTLA一4相互作用形成的協(xié)同刺激信號(hào),在T細(xì)胞活化、增殖、輔助性T細(xì)胞(Th)分化
2、及效應(yīng)性細(xì)胞因子分泌中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。干預(yù)協(xié)同刺激信號(hào)是目前誘導(dǎo)抗原特異性免疫耐受和調(diào)控Th細(xì)胞分化的重要手段。以往的研究結(jié)果顯示,于孕早期以抗CD80和CD86單克隆抗體阻斷該協(xié)同刺激通路,可以誘導(dǎo)CBA/J孕鼠對(duì)DBA/2父系抗原的免疫耐受,協(xié)同刺激分子的表達(dá)亦發(fā)生相應(yīng)的改變。人類母胎界面局部存在著豐富的免疫活性細(xì)胞,這些免疫活性細(xì)胞表面表達(dá)協(xié)同刺激分子。本文以正常早孕人流蛻膜組織為對(duì)照組,選取自然流產(chǎn)患者蛻膜組織,應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄一
3、聚合酶鏈反應(yīng)(RT一PCR)和免疫組化方法從mRNA和蛋白水平,分析協(xié)同刺激分子CD80/CD86和CD28/CTLA一4的表達(dá),以期闡明人類母胎界面局部協(xié)同刺激分子在免疫耐受中的作用,以及與人類早期妊娠失敗的關(guān)系。 第一部分CD80和CD86在人類蛻膜組織的表達(dá)及其在母一胎免疫耐受中的作用 目的:探討正常妊娠以及自然流產(chǎn)蛻膜協(xié)同刺激分子CD80和CD86的mRNA和蛋白表達(dá)特征,以及人早孕蛻膜CD80和CD86表達(dá)與自
4、然流產(chǎn)的關(guān)系。 方法:于孕5一10周選擇自然流產(chǎn)蛻膜組織作為實(shí)驗(yàn)組;孕周相同正常妊娠蛻膜組織為對(duì)照組,每組選擇20例。采用反轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(RT一PCR)和免疫組化方法評(píng)價(jià)協(xié)同刺激分子CD80、CD86的表達(dá)方式和表達(dá)水平,以解析CD80和CD86在母一胎免疫耐受中的可能機(jī)制。 結(jié)果:CD80只在部分標(biāo)本中表達(dá),CD86則穩(wěn)定表達(dá)于所有的標(biāo)本中,這種表達(dá)方式無(wú)論是轉(zhuǎn)錄水平還是翻譯水平的分析呈現(xiàn)一致。免疫組化分析發(fā)現(xiàn),
5、CD80和CD86主要表達(dá)于蛻膜基質(zhì)細(xì)胞,少量的淋巴細(xì)胞也表達(dá)這兩種分子。在轉(zhuǎn)錄水平比較顯示,CD80表達(dá)水平在兩組中無(wú)明顯差異;自然流產(chǎn)組蛻膜CD86表達(dá)明顯高于正常妊娠蛻膜組織。翻譯水平結(jié)果也顯示,自然流產(chǎn)組蛻膜CD86表達(dá)高于正常妊娠組;而CD80在兩組間表達(dá)無(wú)明顯差異。 結(jié)論:母胎界面CD86過表達(dá)啟動(dòng)局部T細(xì)胞過度激活,可能導(dǎo)致孕早期妊娠失敗。 第二部分自然流產(chǎn)蛻膜的協(xié)同刺激分子受體CD28、CTLA一4的表達(dá)
6、與自然流產(chǎn)的關(guān)系 目的:了解協(xié)同刺激分子CD28、CTLA一4在蛻膜組織中的表達(dá)特征,及其與早孕期妊娠失敗的關(guān)系。 方法:于孕5—10周自然流產(chǎn)的蛻膜組織作為實(shí)驗(yàn)組,相同孕周選擇人工流產(chǎn)的正常妊娠蛻膜組織為對(duì)照組,每組選擇20例。采用反轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(RT—PCR)和免疫組化方法測(cè)定協(xié)同刺激分子CD28、CTLA一4的表達(dá)水平,以分析CD28、CTLA一4在母胎免疫耐受建立和維持中的作用。 結(jié)果:CTLA一4
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