創(chuàng)傷早期患者血漿中氣體信號分子表達分析.pdf

1、目的:近年來，隨著人類社會活動空間機械化程度的提高，嚴重的、多部位、多臟器創(chuàng)傷發(fā)生率日趨增高。除了創(chuàng)傷引起患者直接損傷外，炎癥介質(zhì)“二次打擊”對機體組織器官也造成的嚴重的傷害，所以如何預防、控制炎癥介質(zhì)失控狀態(tài)對機體造成的二次傷害，從而阻斷SIRS(systemicinflammatory response syndrome)向更嚴重的MODS（multiple organdysfunction syndrome）發(fā)展具有重要意義。內(nèi)源

2、性一氧化氮(nitricoxide，NO)、一氧化碳(carbon monoxide，CO)、硫化氫(hydrogen sulfide，H2S)三種氣體信號分子已被證實存在于人體的炎癥反應過程，但對于不同疾病，不同時期的影響如何仍值得進一步探討研究認識，本實驗將檢測在嚴重創(chuàng)傷初期，不同程度創(chuàng)傷患者的血漿中三種氣體分子表達情況，結(jié)合患者MODS發(fā)生率，死亡發(fā)生率，血乳酸指標來探討三種氣體分子在創(chuàng)傷初期炎癥反應中的關系，從氣體信號分子角度了

3、解早期創(chuàng)傷發(fā)展情況。
　　方法:河北醫(yī)科大學第三附屬醫(yī)院急診科接診急性創(chuàng)傷患者60例。入選的創(chuàng)傷患者建立液路后，立即抽血，并送檢血氣分析。記錄患者血中乳酸(Lactic acid)數(shù)值。對患者基本情況進行評價后，記錄患者創(chuàng)傷嚴重程度(injury severity score，ISS)評分，根據(jù)ISS創(chuàng)傷評分將其分為三個亞組:輕（＜16分）、中（16-25分）、重（＞25分）三組。同時取靜脈血約3ml，注入含分離膠的試管中，室溫靜

4、置20分鐘后，使用離心機離心20分鐘(3000轉(zhuǎn)/分)，仔細收集上清，分裝入3個離心（eppendorf，EP）管中（每個EP管內(nèi)樣品約100ul），于-80℃冰箱凍存?zhèn)溆?。標本收集全后，用iNOS、HO-1的酶聯(lián)免疫吸附試驗(enzyme-linked immuno sorbent assay，ELISA)試劑盒分別測定其血漿濃度，采用化學還原分光光度計法測血漿中H2S含量。并監(jiān)測患者后期多器官功能障礙綜合癥(multiple org

5、an dysfunctionsyndrome MODS)發(fā)生率（診斷標準為修正的Fry-MODS診斷標準）和28天死亡率，根據(jù)患者后續(xù)是否發(fā)生MODS，分為MODS組和非MODS組患者是否死亡，分為存活組和死亡組。
　　結(jié)果:
　　1三組創(chuàng)傷患者一般情況的比較
　　三組創(chuàng)傷病人的性別、年齡、自創(chuàng)傷發(fā)生至來院就診時間均無明顯統(tǒng)計學差異。(P＞0.05)
　　2一氧化氮合酶iNOS、血紅素加氧酶HO-1、內(nèi)源性硫化氫

6、表達比較
　　通過方差分析，進行組組間比較，均存在統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。iNOS在三組患者血漿中表達較對照組均升高，并隨著創(chuàng)傷評分升高呈持續(xù)升高趨勢(P＜0.05)。HO-1在三組創(chuàng)傷患者血漿中表達較正常組均降低，創(chuàng)傷程度越重其在血漿中的表達水平越低，尤其創(chuàng)傷評分＞25分的第三組顯著性越大(P＜0.05)。內(nèi)源性硫化氫在血漿中含量較正常組降低。隨著創(chuàng)傷程度加劇其在血漿中的含量明顯低于正常對照組，呈持續(xù)降低趨勢差異具有顯著統(tǒng)計

7、學意義(P＜0.05)。
　　3三組患者血漿中iNOS、HO-1、內(nèi)源性硫化氫表達與血乳酸值比較
　　將所有創(chuàng)傷病人血漿中氣體信號分子表達濃度與血漿中血乳酸進行直線回歸分析，結(jié)果顯示(1) iNOS與血乳酸呈正相關(β＞0)，(2)HO-1與血乳酸呈負相關(β＜0)，(3)內(nèi)源性硫化氫與血乳酸也成負相關(β＜0)。
　　4三組患者血漿中iNOS、HO-1、內(nèi)源性硫化氫表達與MODS發(fā)生率比較
　　4.1 MODS

8、組的血漿iNOS明顯高于MODS組具有統(tǒng)計學差異(P＜0.05);
　　4.2 MODS組血漿HO-1明顯低于非MODS組且差異具有顯著性(P＜0.05);
　　4.3 MODS組血漿H2S明顯低于非MODS組且差異具有顯著性。
　　5三組患者血漿中iNOS、HO-1、內(nèi)源性硫化氫表達與死亡率比較:
　　5.1死亡組的血漿iNOS明顯高于存活組具有統(tǒng)計學差異(P＜0.05);
　　5.2死亡組血漿HO-1明

9、顯低于存活組且差異具有顯著性(P＜0.05);(3)死亡組血漿H2S明顯低于存活組且差異具有顯著性。
　　結(jié)論:
　　1創(chuàng)傷早期血漿一氧化氮(NO)濃度異常升高及升高程度，血漿一氧化氮(CO)，血漿硫化氫(H2S)濃度降低及降低程度與ISS評分，組織的灌注不足，血乳酸升高有密切關系。后MODS的發(fā)生發(fā)展和預后密切相關，檢測血漿iNOS、血漿HO-1、血漿硫化氫水平可以作為參考指標來評估早期創(chuàng)傷程度及預后情況;
　　2血