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1、目的:探討彈性蛋白肽對(duì)髓樣樹(shù)突狀細(xì)胞表面共刺激分子表達(dá)的影響
方法:利用含有40ng/mL小鼠粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)、10ng/mL白介素4(IL-4)和10%胎牛血清(FBS)的RPMI1640培養(yǎng)基刺激誘導(dǎo)小鼠骨髓來(lái)源的單個(gè)核細(xì)胞增殖分化為符合實(shí)驗(yàn)要求的高純度未成熟髓樣樹(shù)突狀細(xì)胞(imDC),收集細(xì)胞隨機(jī)分為空白對(duì)照組及彈性蛋白肽組:空白對(duì)照組不加任何刺激,彈性蛋白肽組加入終濃度為1ug/mL的彈性蛋白
2、肽(elastin peptide,VGVAPG)刺激,兩組細(xì)胞在相同條件下繼續(xù)培養(yǎng)24h。然后收集細(xì)胞利用流式細(xì)胞技術(shù)和RT-PCR技術(shù)檢測(cè)樹(shù)突狀細(xì)胞表面共刺激分子CD40、CD80和CD86的表達(dá)變化,ELISA法檢測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞上清液細(xì)胞因子白介素6(IL-6)和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)的水平變化。
結(jié)果:流式細(xì)胞術(shù)及RT-PCR檢測(cè)均顯示,空白對(duì)照組樹(shù)突狀細(xì)胞表面共刺激分子表達(dá)較低,彈性蛋白肽刺激后,樹(shù)突狀細(xì)胞表面共刺
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