槲皮素對(duì)ApoE---小鼠動(dòng)脈粥樣硬化形成及 SDF-1-CXCR4表達(dá)的影響研究.pdf

1、 目的：探討槲皮素對(duì)ApoE-/-小鼠動(dòng)脈粥樣硬化(arteriosclerosis,AS)形成及SDF-1/CXCR4表達(dá)的影響作用。 方法：1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組：40只6周齡的ApoE-/-小鼠正常喂養(yǎng)一周后隨機(jī)分為四組(N=10只)：模型對(duì)照組(高脂飲食)；槲皮素低劑量組(高脂飲食+槲皮素50 mg/kg/d)；槲皮素中劑量組(高脂飲食+槲皮素100 mg/kg/d)、槲皮素高劑量組(高脂飲食+槲皮素150 mg/kg/d),同時(shí)選

2、取相同遺傳背景的6周齡正常C57BL/6J雄性小鼠10只作為正常對(duì)照組(普通飲食)。各組分別于給藥后第10周和第20周,隨機(jī)處死5只小鼠并取材。2、取小鼠眼眶血,用ELISA法檢測(cè)血清中SDF-1和CXCR4的水平；取小鼠主動(dòng)脈弓,HE染色觀察動(dòng)脈粥樣硬化病變；免疫組織化學(xué)技術(shù)及Real-time PCR檢測(cè)SDF-1和CXCR4在主動(dòng)脈上的表達(dá)情況。結(jié)果：1、HE染色結(jié)果：正常對(duì)照組：10周和20周的結(jié)果均示內(nèi)膜無增生,內(nèi)彈力膜完整無

3、腫脹,內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)正常。模型對(duì)照組：10周時(shí),內(nèi)膜增厚,可見平滑肌細(xì)胞增殖以及大量泡沫細(xì)胞形成,并形成纖維斑塊。20周時(shí)內(nèi)彈力膜斷裂,粥樣斑塊形成；槲皮素組：10周時(shí),高劑量組和中劑量組動(dòng)脈管壁均無明顯病變,低劑量組可見泡沫細(xì)胞形成；20周時(shí),高劑量組和中劑量組內(nèi)皮細(xì)胞缺失,偶見平滑肌細(xì)胞遷移至內(nèi)膜,少量泡沫細(xì)胞形成；低劑量組可見粥樣斑塊形成,但面積較模型對(duì)照組小。2、免疫組化結(jié)果分析：相同時(shí)間點(diǎn)比較,正常對(duì)照組：SDF-1主要表達(dá)于內(nèi)

4、皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞,CXCR4主要表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞,但細(xì)胞著色淺,表達(dá)量少；模型對(duì)照組：平滑肌細(xì)胞以及泡沫細(xì)胞呈深棕黃色,顯示SDF-1和CXCR4有大量表達(dá)；槲皮素組：高中低劑量的三個(gè)實(shí)驗(yàn)組與模型對(duì)照組比較,細(xì)胞著色較淺,表達(dá)量均有減少(P<0.05)；與正常對(duì)照組比較,低劑量組、中劑量組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。不同時(shí)間點(diǎn)比較, SDF-1在模型對(duì)照組的表達(dá)量隨時(shí)間延長而增加(P<0.05)；(3)ELISA檢測(cè)血清中SDF-1和

5、CXCR4水平,Real-time PCR檢測(cè)SDF-1和CXCR4的mRNA基因表達(dá)結(jié)果：在相同時(shí)間點(diǎn)比較,SDF-1及CXCR4在模型對(duì)照組中表達(dá)最高,正常對(duì)照組表達(dá)最低,槲皮素組介于兩者之間,且隨著藥物劑量的增加SDF-1和CXCR4表達(dá)量進(jìn)行性下降,尤其是CXCR4在高劑量組與正常對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；不同時(shí)間點(diǎn)相同組比較,模型對(duì)照組的SDF-1和CXCR4均隨時(shí)間延長而增加(P<0.05),槲皮素組和正常對(duì)照