三株生防細(xì)菌對(duì)花生寄生曲霉的拮抗作用及促進(jìn)花生萌發(fā)新菌株的篩選.pdf

1、花生是重要的油用、食用型經(jīng)濟(jì)作物，含有豐富的脂肪、蛋白質(zhì)和維生素，具有很高的食用價(jià)值。我國(guó)是最大的花生生產(chǎn)國(guó)，花生產(chǎn)量約占世界的五分之二。花生種植、收獲及儲(chǔ)藏過(guò)程中易受真菌侵染產(chǎn)生黃曲霉毒素(Aflatoxin,AFT)，特別是南方的溫暖潮濕氣候十分有利于黃曲霉毒素的產(chǎn)生，從而使花生品質(zhì)受到嚴(yán)重影響。黃曲霉毒素具有極強(qiáng)的毒性，具有誘導(dǎo)突變、抑制免疫和致癌作用，是導(dǎo)致肝癌的主要因素之一，對(duì)人類(lèi)健康和環(huán)境造成了極大的危害。自上世紀(jì)60年代發(fā)

2、現(xiàn)黃曲霉毒素危害以來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)黃曲霉毒素相關(guān)領(lǐng)域做了大量的研究工作。近年來(lái)利用環(huán)境友好型生物防治技術(shù)已經(jīng)受到各國(guó)政府和科學(xué)家的青睞，各國(guó)科學(xué)家紛紛采用生物學(xué)方法進(jìn)行黃曲霉毒素防治策略的研究。研究主要包括培育黃曲霉毒素抗性作物品種，利用其它微生物的競(jìng)爭(zhēng)、拮抗作用抑制產(chǎn)毒菌株的生長(zhǎng)，從植物源或微生物發(fā)酵液中提取抗菌活性物質(zhì)以抑制黃曲霉生長(zhǎng)和產(chǎn)毒，已經(jīng)取得了初步的成效。
　　本實(shí)驗(yàn)室致力于用微生物方法防治黃曲霉毒素污染，已經(jīng)分離出多

3、株對(duì)黃曲霉毒素產(chǎn)生菌有顯著抑制作用的生防細(xì)菌。本研究利用拮抗效果較好的三株細(xì)菌B5、LN和04接種花生，觀察其對(duì)花生寄生曲霉侵染的抑制作用及對(duì)花生萌發(fā)的影響，并從其它抗黃曲霉毒素生防細(xì)菌中篩選出對(duì)花生萌發(fā)有促進(jìn)作用的新菌株。
　　首先將三株細(xì)菌發(fā)酵后制成菌懸液，用108，109，1010cfuml-1三種濃度菌懸液浸種處理，在0.8％的瓊脂平板上進(jìn)行花生萌發(fā)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)三種濃度04浸種均能促進(jìn)花生萌發(fā)，109cfuml-1處理促進(jìn)效

4、果最明顯。1010cfuml-1B5和LN浸種顯著抑制了花生萌發(fā)，108cfuml-1和109cfuml-1濃度B5和LN浸種無(wú)抑制作用，于是采用109cfuml-1濃度的三株細(xì)菌進(jìn)一步做瓊脂平板花生寄生曲霉拮抗實(shí)驗(yàn)。拮抗實(shí)驗(yàn)表明，04在0.8%的瓊脂平板條件下對(duì)寄生曲霉表現(xiàn)理想的拮抗效果，LN和B5對(duì)寄生曲霉沒(méi)有拮抗作用。
　　同時(shí)，采用1010cfuml-1三株細(xì)菌浸種后于土培實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行花生萌發(fā)實(shí)驗(yàn)與寄生曲霉拮抗實(shí)驗(yàn)，結(jié)果

5、顯示，04一定程度上促進(jìn)了根系發(fā)育，LN處理組幼苗生物質(zhì)積累有所提高，B5顯著延遲花生萌發(fā)并抑制花生前期生長(zhǎng)；三株細(xì)菌對(duì)花生果實(shí)及土壤中寄生曲霉均表現(xiàn)抑制作用，其中04對(duì)花生果實(shí)及果殼附近土壤中寄生曲霉抑制效果最好，LN對(duì)根系土壤中寄生曲霉拮抗作用明顯。
　　另外，從其它黃曲霉毒素生防細(xì)菌中篩選出三株顯著促進(jìn)花生萌發(fā)的新菌株，分別為N1KM1、WPS2和WGB3，三株細(xì)菌均為革蘭氏陽(yáng)性。其中N1KM1和WGB3為棒狀桿菌,WPS2