對三株益生菌的生物拮抗性和發(fā)酵工藝條件的研究.pdf

1、微生態(tài)制劑越來越受到人們的關(guān)心和重視，相對于單一種類的微生態(tài)制劑，復(fù)合型微生態(tài)制劑以其更好的療效和作用更加受到關(guān)注。本實驗就是要研究一種三聯(lián)益生菌制劑來替代傳統(tǒng)的抗生素藥物治療腹瀉。傳統(tǒng)治療腹瀉的方法有很多弊端，如四環(huán)素，氟哌酸對嬰幼兒骨骼發(fā)育有影響;氯霉素口服可導(dǎo)致再生障礙性貧血等。微生態(tài)學(xué)研究證明:人體正常菌群，對人類腸道不但具有生物屏障作用，而且對腸道致病菌有較好的抑制作用。為了尋找一種有效的腸道菌群調(diào)整劑，我們選用人體正常菌群之

2、一的嗜酸乳桿菌為主要菌種，制成復(fù)方嗜酸乳桿菌制劑以滿足臨床需要。
　　 目的:
　　 1、通過對已有菌種的鑒定和檢驗，確定三株益生菌對腸道致病菌（大腸埃希菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌、金黃色葡萄球菌）有抑制作用。2、通過拮抗實驗證明三聯(lián)益生菌制劑對致病菌的拮抗作用。3通過對發(fā)酵條件的摸索，為將來的中試和生產(chǎn)提供依據(jù)。
　　 方法:
　　 1通過形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)等方法對各個菌種進行鑒定。
　　 2耐藥性評

3、價實驗:采用藥敏紙片瓊脂擴散法檢測實驗菌株對十種抗生素的敏感程度。
　　 3菌種的生長曲線測定:對三種益生菌和四種腸道致病菌采取連續(xù)培養(yǎng)，每隔一定時間取樣涂平板，記取活菌數(shù)的方式來測定其生長曲線。
　　 4拮抗實驗:單聯(lián)拮抗實驗，將三種益生菌和四種腸道致病菌進行兩兩配對，混合后同時培養(yǎng)，間隔一定時間取樣涂平板，記取活菌數(shù)來觀察每種菌的生長情況。三聯(lián)拮抗實驗，將三種益生菌混合后，再分別與四種腸道致病菌混合培養(yǎng)，間隔一定時間

4、取樣涂平板，記取活菌數(shù)來觀察每種菌的生長情況。
　　 5發(fā)酵工藝的研究:運用正交實驗法，采用三因素（發(fā)酵時間、pH值、發(fā)酵溫度）三水平來設(shè)計實驗。
　　 結(jié)果:
　　 通過各種實驗的鑒定，對已有菌種的特性有個初步的了解和掌握。耐藥性評價實驗可以看出所選用的菌種并沒有抗抗生素的特性，尤其是腸球菌，對萬古霉素沒有抗性，可以正常使用。拮抗實驗證明其對腸道致病菌有拮抗作用。
　　 結(jié)論:
　　 通過各項實