黃曲霉拮抗菌株的分離篩選及對(duì)黃曲霉毒素的降解效果.pdf

1、飼料及原料在運(yùn)輸和儲(chǔ)存過(guò)程中極易受霉菌污染，霉菌污染的飼料不僅破壞其營(yíng)養(yǎng)成分，同時(shí)霉菌及其產(chǎn)生的毒素影響動(dòng)物的安全及生產(chǎn)效率，且通過(guò)食物鏈間接影響到人類(lèi)的安全和健康。黃曲霉是引起飼料霉變的常見(jiàn)菌株，黃曲霉毒素是毒性最強(qiáng)、分布最廣、污染最嚴(yán)重的毒素。常用的黃曲霉及毒素的防治方法有物理法、化學(xué)法及生物法，而生物法效率高且安全無(wú)污染，因此成為國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。
　　本試驗(yàn)利用平板對(duì)峙法初篩和抑菌率法復(fù)篩，從土壤中分離得到一株高效抑制黃曲

2、霉的菌株N-2，通過(guò)形態(tài)觀察、生理生化測(cè)定和16S rDNA序列分析，確定其為解淀粉芽孢桿菌Bacillus amyloliquefaciens。通過(guò)急性毒理試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，菌株N-2安全無(wú)毒。菌株N-2通過(guò)改變黃曲霉菌絲形態(tài)及降低黃曲霉孢子萌發(fā)率抑制黃曲霉生長(zhǎng)。菌株N-2使黃曲霉菌絲變粗而短，菌絲體內(nèi)部原生質(zhì)體分布不均勻，對(duì)黃曲霉孢子萌發(fā)抑制率為81.08％。通過(guò)菌株N-2抑制黃曲霉活性組分分析試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，菌株N-2發(fā)酵液和無(wú)N-2菌體上

3、清液對(duì)黃曲霉的抑制率顯著高于胞懸液和胞內(nèi)液，而菌株N-2發(fā)酵液和無(wú)N-2菌體上清液對(duì)黃曲霉的抑制率無(wú)差異(P＞0.05)，因此，可以推測(cè)菌株N-2抑制黃曲霉生長(zhǎng)的活性物質(zhì)為胞外分泌物。菌株N-2發(fā)酵液能降解黃曲霉毒素B1(Aflatoxin B1，AFB1)，降解率為37.81％。
　　微生物經(jīng)口進(jìn)入胃腸道后，必須耐受胃酸低pH及腸道中膽鹽高滲環(huán)境才能發(fā)揮其作用，本試驗(yàn)結(jié)果表明，模擬胃液處理菌株N-24h，其活菌數(shù)達(dá)96.11％。

4、模擬膽鹽處理菌株N-224 h，其活菌數(shù)達(dá)95.68％。菌株N-2對(duì)大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、痢疾桿菌有抑制效果，抑菌圈直徑分別為19.57 mm、18.39 mm、17.92 mm。
　　本試驗(yàn)利用N-2發(fā)酵液進(jìn)行飼喂肉雞試驗(yàn)，通過(guò)檢測(cè)肉雞的生長(zhǎng)性能、血液生化指標(biāo)及器官的組織切片等，研究不同劑量菌株N-2的發(fā)酵液對(duì)肉雞飼料中的黃曲霉毒素降解效果。試驗(yàn)結(jié)果表明，基礎(chǔ)日糧每千克添加0.2 L菌株N-2發(fā)酵液能改善AFB1對(duì)肉雞的毒害作用，