中醫(yī)鴉膽子和生姜中黃曲霉毒素和赭曲霉毒素A的檢測研究.pdf

1、真菌毒素是由真菌產(chǎn)生的次級代謝有毒產(chǎn)物，其中 AFBi、AFB2、AFGi, AFG2& OTA不僅毒性大而且污染廣泛。中藥材從種植、采收到貯藏極易受到真菌毒素的侵害，不經(jīng)控制而被使用后會造成更加嚴重的危害。因此，有必要建立準確、靈敏、可靠、簡便的檢測方法監(jiān)控中藥中真菌毒素的污染水平，以保證中藥用藥安全并為制定相應(yīng)的限量標準提供依據(jù)。
　　本課題通過查閱文獻和預(yù)實驗，針對鴉膽子和生姜等應(yīng)用廣泛且污染頻率較高的中藥，建立了黃曲霉毒素

2、和赭曲霉毒素A的檢測方法，主要研究內(nèi)容如下：
　　1、建立了免疫親和柱凈化-髙效液相色譜-在線柱后光化學衍生-熒光法測定中藥鴉膽子中AFB1、AFB2、AFG1、AFG2及質(zhì)譜確證
　　樣品以甲醇-水溶液提取，經(jīng)免疫親和柱凈化-高效液相色譜-在線柱后光化學衍生-熒光檢測器（IAC-HPLC-PCD-FLD)檢測，并對陽性樣品進行HPLC-MS/MS確證。AFB1、AFB2、AFG1、AFG2分別在0.50?50.00、0.1

3、5?15.00、0.50?50.00、0.15?15.00 n g/m L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，檢測限分別為0.08、0.015、0.06、0.02 fig/kg,平均加樣回收率為74.3％?100.8%。陽性樣品AFB1和AFs的污染水平分別為0.26?22.89和0.31?27.52陽/kg。本實驗首次建立了中藥鴉膽子中黃曲霉毒素檢測的方法，并對陽性樣品進行了質(zhì)譜確證。與中國藥典中方法相比，該方法操作簡單、準確性高、可靠性強，適用于對

4、鴉膽子中黃曲霉毒素污染的監(jiān)控。
　　2、建立了免疫親和柱凈化-超高效液相色譜-熒光法快速同時檢測中藥生姜中AFBi、AFB2、AFG? AFG2和 OTA及質(zhì)譜確證
　　樣品以甲醇-水溶液提取，經(jīng)免疫親和柱凈化后，用超高效液相色譜-熒光檢測器（IAC-UPLC-FLD)進行快速檢測，并以HPLC-MS/MS對陽性樣品進行確證。AFB1、AFB2、AFG1、AFG2和OTA平均加樣回收率為75.2%?99.7%，檢測限分別為0

5、.04、0.04、0.10、0.07和0.25陽/kg。陽性樣品AFB1和OTA的最大污染量分別為6.50和20.66呢/kg，同時對陽性樣品進行了質(zhì)譜確證。該方法快速、準確、簡便，可用于生姜中AFs和OTA的快速檢測。
　　3、建立了分子印跡固相萃取柱凈化-超高效液相色譜-熒光法快速檢測生姜中OTA的方法及質(zhì)譜確證
　　樣品采用乙腈-水溶液提取，經(jīng) MIP-SPE柱凈化后，以 UPLC-FLD檢測。OTA在1.00?100