牛奶中黃曲霉毒素M1檢測方法的建立及飼料中黃曲霉毒素對牛奶品質(zhì)的影響.pdf

1、黃曲霉毒素是一種來源于自然界中霉菌的毒素，已經(jīng)被證明為導(dǎo)致人類癌癥的一類致癌源。黃曲霉毒素M1則是黃曲霉毒素B1的代謝產(chǎn)物，存在于食用了黃曲霉毒素B1污染飼料的動(dòng)物的乳中，各國都對乳中黃曲霉毒素M1進(jìn)行了嚴(yán)格限量。關(guān)于黃曲霉毒素B1的預(yù)防、去除和解毒的研究工作，顯得非常重要。雖然國內(nèi)外對黃曲霉毒素的去除和解毒進(jìn)行了大量的研究，可迄今為止還沒有一種可供工業(yè)上大規(guī)模應(yīng)用的理想的解毒方法。所以，及時(shí)對食品中黃曲霉毒素進(jìn)行定量檢測，是目前最大限

2、度地降低黃曲霉毒素危害的最好措施。 本研究擬建立起免疫親和柱-熒光光度法快速測定牛奶中黃曲霉毒素M1的方法。試樣經(jīng)過離心、脫脂、過濾后，濾液經(jīng)過鍵合有黃曲霉毒素M1特殊抗體的免疫親和柱凈化，此抗體對黃曲霉毒素M1具有專一的識(shí)別能力，黃曲霉毒素M1鍵合在分離柱中的抗體上。用甲醇與水為10：90的混合液將免疫親和柱上雜質(zhì)除去；以甲醇與水之比為80：20的混合液通過分離柱洗脫，加入溴溶液衍生，以提高測定靈敏度。衍生化后的洗脫液于熒光光

3、度計(jì)中測定黃曲霉毒素M1。通過選擇最佳激發(fā)波長和發(fā)射波長；對陰性牛奶樣品添加特定量的標(biāo)準(zhǔn)樣品，進(jìn)行平行試驗(yàn)，判斷該方法的精確度；進(jìn)行三個(gè)水平的標(biāo)準(zhǔn)樣品回收率試驗(yàn)；確定檢出限。從而評判方法的準(zhǔn)確性和精確性。 采用免疫親和柱——熒光光度法檢測牛奶中的黃曲霉毒素M1，檢測低限為0.01μg/kg，在0.1～1.0μg/kg范圍內(nèi)，回收率為89.6％～96.1％，變異系數(shù)為0.52％～5.8％，分析一個(gè)樣品的時(shí)間小于30min，分析過程

4、中不使用黃曲霉毒素M1標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。本方法具有準(zhǔn)確、簡單、快速、安全等特點(diǎn)，可以滿足批量樣品的檢測需要。 被檢測的青貯料、粗飼料、全混合日糧樣品中黃曲霉毒素B1平均含量分別為8.28μg/kg、3.11μg/kg和6.56μg/kg，屬于輕度污染。50份奶樣中，附性最高值為0.203μg/kg，陽性最低值為0.003μg/kg，陽性平均值為0.089μg/kg，均符合我國目前的限量標(biāo)準(zhǔn)。奶牛樣品中黃曲霉毒素M1與飼料中黃曲霉毒素的污