L-NAME聯(lián)合ZnPP-9對(duì)大鼠肝硬化門(mén)靜脈壓力的影響及其相關(guān)酶學(xué)研究.pdf

1、目的：
　　 應(yīng)用NO抑制劑L-NAME及CO抑制劑ZnPP-9抑制內(nèi)源性NO、CO的生成，觀察肝硬化大鼠門(mén)靜脈壓力以及硫化氫（H2S）/胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）體系的變化，從而探討NO/NOS體系及CO/HO-1體系在大鼠肝硬化門(mén)靜脈高壓中的作用及對(duì)H2S/CSE體系的影響。
　　 材料和方法：
　　 復(fù)合因素法制備肝硬化大鼠模型，造模結(jié)束后，將SD大鼠隨機(jī)分為4組：正常對(duì)照組（NC組）、正常對(duì)照+左旋硝基

2、精氨酸甲酯（L-NAME）+鋅原卟啉-9（Znpp-9）組（NC+L-NAME+ZnPP-9組）、肝硬化模型組（CIRM組）、肝硬化模型+左旋硝基精氨酸甲酯（L-NAME）+鋅原卟啉-9（Znpp-9）組（CIRM+L-NAME+ZnPP-9組）。利用插管法測(cè)定大鼠門(mén)靜脈壓力；硝酸還原酶法測(cè)定大鼠血漿中NO的含量；聯(lián)二亞硫酸鹽法測(cè)定CO的含量；運(yùn)用敏感硫電極方法檢測(cè)大鼠血漿中H2S的含量；應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法對(duì)大鼠門(mén)靜脈內(nèi)皮細(xì)胞上eNO

3、S、iNOS、HO-1以及CSE蛋白進(jìn)行定位及半定量分析；利用蛋白質(zhì)免疫印跡技術(shù)（Western blot）測(cè)定大鼠肝組織中eNOS、iNOS、HO-1以及CSE蛋白的表達(dá)量。
　　 結(jié)果:
　　 1.肝硬化大鼠模型的建立
　　 肝硬化大鼠肝臟組織經(jīng)病理學(xué)證實(shí)，大體上可見(jiàn)肝硬化大鼠肝臟變形，失去正常光澤，表面凹凸不平呈結(jié)節(jié)狀，質(zhì)地硬，光鏡下見(jiàn)肝細(xì)胞再生，脂肪變性、纖維結(jié)締組織增生及假小葉形成
　　 2.門(mén)

4、靜脈壓力測(cè)定
　　 與NC組相比，CIRM組壓力明顯升高（P＜0.01），而NC+L-NAME+ZnPP-9組壓力則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；與CIRM組相比，CIRM+L-NAME+ZnPP-9組壓力明顯降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。
　　 3.血漿中NO、CO及H2S含量變化
　　 與NC組相比，CIRM組血漿中NO、CO含量明顯升高，H2S的含量則明顯降低（P＜0.01），NC+L-NAME+ZnPP-9組NO、

5、CO含量明顯降低，H2S的含量則明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與CIRM組相比，CIRM+L-NAME+ZnPP-9組NO、CO含量明顯降低，H2S的含量則明顯升高（P＜0.01）。
　　 4.門(mén)靜脈內(nèi)皮細(xì)胞上eNOS、iNOS、HO-1以及CSE蛋白免疫組化觀察
　　 與NC組相比，CIRM組eNOS、iNOS、HO-1蛋白含量明顯升高，CSE蛋白的含量則明顯降低（P＜0.01），NC+L-NAME+ZnPP

6、-9組eNOS、iNOS、HO-1蛋白含量明顯降低，CSE蛋白的含量則明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與CIRM組相比，CIRM+L-NAME+ZnPP-9組eNOS、iNOS、HO-1含量明顯降低，CSE蛋白的含量則明顯升高（P＜0.01）。
　　 5.肝組織中eNOS、iNOS、HO-1以及CSE蛋白的表達(dá)
　　 與NC組相比，CIRM組iNOS、HO-1蛋白含量明顯升高，eNOS、CSE蛋白的含量則明顯降低

7、，而（P＜0.01），NC+L-NAME+ZnPP-9組eNOS、iNOS、HO-1蛋白含量明顯降低，CSE蛋白的含量則明顯升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；與CIRM組相比，CIRM+L-NAME+ZnPP-9組eNOS、iNOS、HO-1含量明顯降低，CSE蛋白的含量則明顯升高（P＜0.01）。
　　 結(jié)論：
　　 1.NO/NOS體系及CO/HO-1體系對(duì)肝硬化門(mén)靜脈高壓的形成具有重要的調(diào)節(jié)作用。