楊桃果總黃酮對(duì)L-NAME誘導(dǎo)的高血壓大鼠心肌肥厚作用的研究.pdf

1、目的:觀察楊桃果總黃酮對(duì)一氧化氮合酶抑制劑NG-硝基-L-精氨酸甲酯(NG-nitro-L-arginine-methlester，L-NAME)所導(dǎo)致的高血壓大鼠降血壓作用，以及對(duì)大鼠心臟，心肌組織的影響，探究其降血壓機(jī)制。
　　方法:制備楊桃果總黃酮（total flavonoids of Averrhoa carambola L.fruit，TFACF）取新鮮楊桃果實(shí)榨汁，濾液加乙醇回流。石油醚，乙酸乙酯、正丁醇萃取。濃縮后

2、，上大孔樹(shù)脂富集，即可得到總黃酮。
　　正常大鼠用頸總動(dòng)脈插管法從十二指腸給予生理鹽水、TFACF低劑量、中劑量和高劑量（300mg·kg-1、600mg·kg-1、1200mg·kg-1）利用MPA多媒體生物信號(hào)記錄系統(tǒng)測(cè)定收縮壓(systolic blood pressure，SBP)和舒張壓(diastolic blood pressure，DBP)。并觀察各組，給藥后1、5、10、20、60、90、120、180min時(shí)血

3、壓和心率的變化。
　　灌胃給予Wistar大鼠造模藥一氧化氮合酶抑制劑(50 mg·kg-1·d-1)，連續(xù)給藥4周，復(fù)制高血壓模型。造模成功后篩選出SBP＞140mmHg和（或）DBP＞90mmHg的50只大鼠，按照隨機(jī)數(shù)字表法，分為5組，即TFACF低劑量組（300 mg·kg-1·d-1）、TFACF中劑量組（600 mg·kg-1·d-1）、TFACF高劑量組(1200 mg·kg-1·d-1)，卡托普利組(10mg·mg

4、·kg-1·d-1)，模型對(duì)照組每組10只。另取10只正常Wistar大鼠作為空白組。按照大鼠質(zhì)量于每日固定時(shí)間灌胃給藥一次，空白對(duì)照組及模型組給予等容積的蒸餾水。每周固定時(shí)間用ALC-nibl無(wú)創(chuàng)尾動(dòng)脈壓測(cè)定系統(tǒng)測(cè)定大鼠的尾動(dòng)脈壓和心率。
　　給藥5周后，麻醉大鼠開(kāi)腹，并從腹主動(dòng)脈取血，摘取心臟，稱取左室重量后并計(jì)算左室重量指數(shù)(left ventricular mass index，LVMD。采用ELISA法測(cè)定大鼠血清中An

5、gⅡ、ET-1、IL-6和TNF-α濃度，用硝酸還原酶法測(cè)定血清中一氧化氮(NO)濃度，用硫代巴比妥酸(TBA)法測(cè)定大鼠血清中MDA的含量。心肌組織切片，進(jìn)行HE染色和Masson染色。采用免疫組化法觀察Ⅰ型膠原，Ⅲ型膠原，TNF-α，NF-κB，PPAR-γ在心肌組織中的表達(dá)情況。測(cè)定心肌組織中NF-κB mRNA的含量。
　　結(jié)果:十二指腸給藥后5分鐘出現(xiàn)降壓作用，TFACF高、中、低三個(gè)給藥組均在20分鐘出現(xiàn)最大降壓，SB

6、P和DBP值與空白組相比有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)，其中高劑量組下降幅度最大，達(dá)到3 KPa且能持續(xù)40分鐘。TFACF各劑量組均能劑量依賴性的降低SBP、DBP和MBP值。給藥后120分鐘各組血壓逐漸上升。但對(duì)正常大鼠心率無(wú)影響。
　　給藥5周之后，與模型組比較，楊桃果總黃酮各劑量組血壓均有不同下降的程度。其中中劑量組和高劑量組在給藥第1周后，血壓就出現(xiàn)下降趨勢(shì)(P＜0.05)，并且高劑量組在第4周開(kāi)始血壓維持在

7、一個(gè)較穩(wěn)定的水平。楊桃果總黃酮低劑量組在給藥后的第2周，大鼠的血壓開(kāi)始有下降的趨勢(shì)(P＜0.05)。但楊桃果總黃酮各劑量組和卡托普利組對(duì)心率影響不明顯(P＞0.05)。
　　與模型組相比，卡托普利組和TFACF各劑量組的LVMI值有不同程度的降低，高劑量組差異具有顯著性(P＜0.01)?？ㄍ衅绽M和TFACF高劑量組血清中AngⅡ(P＜0.01)、ET-1(P＜0.01)、IL-6(P＜0.01)、MDA(P＜0.01)和TNF-

8、α(P＜0.01)的含量均有所降低，NO含量有所升高(P＜0.01)。TFACF中劑量和低劑量組MDA和TNF-α的含量呈下降趨勢(shì)(P＜0.05)，NO含量呈升高趨勢(shì)，并呈現(xiàn)劑量依賴性的趨勢(shì)。
　　HE染色結(jié)果觀察到，卡托普利組和TFACF治療組明顯緩解心肌細(xì)胞肥大程度，心肌間質(zhì)纖維組織基本正常。Masson染色觀察到，TFACF低劑量組有少量心肌細(xì)胞間質(zhì)膠原沉積，卡托普利組TFACF高中劑量組無(wú)明顯膠原沉積(P＜0.05)。

9、r>　　TFACF中劑量組和低劑量組心肌組織有少量Ⅰ型膠原纖維化表現(xiàn)。但卡托普利組和TFACF高劑量組心肌組織Ⅰ型膠原蛋白的表達(dá)，明顯降低(P＜0.01)。低劑量組心肌組織有少量Ⅲ型膠原纖維化表現(xiàn)。卡托普利組TFACF中劑量組和高劑量組心肌組織Ⅲ型膠原蛋白表達(dá)水平明顯降低(P＜0.01)。
　　卡托普利組和TFACF高劑量組的大鼠心肌組織TNF-α蛋白表達(dá)降低，差異具有顯著性(P＜0.05)。TFACF中劑量組和低劑量組也有部分T

10、NF-α蛋白表達(dá)，但TFACF中劑量組明顯少于低劑量組，對(duì)TNF-α的抑制呈現(xiàn)劑量的依賴性。
　　TFACF高劑量組和卡托普利組心肌組織的NF-κB蛋白表達(dá)，明顯降低（P＜0.01)，差異具有顯著性。但TFACF中劑量組和低劑量組心肌組織的NF-κB蛋白表達(dá)，與模型組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　卡托普利組、TFACF各劑量組的心肌組織PPAR-γ蛋白表達(dá)，明顯升高(P＜0.01)，差異具有顯著性。與模型組比較，卡托普利組和